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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

[求助] 酵母双杂-转完质粒的酵母在一缺液体培养基上不长???已有1人参与

各位虫友好:
       最近在用泛素化酵母双杂系统筛选互作蛋白,用的菌株是NMY32,当把Bait载体转进去后,在SD-LEU的板子(PH=5.8)上长出克隆,两三天后能到2-3mm,但挑克隆划线后转到液体的培养基上(自然PH值),30度,200rpm,摇了快两天了,OD600到了0.3左右就再也不增加了,连续挑了好几个克隆都是如此,不知道有没有虫友用过这套体系,是否也碰到过类似的问题?请多多指教
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jiayoubashaonian
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匆匆旅者

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by javerson112 at 2012-09-22 10:01:20
我现在也遇到这个问题。我把pGBKT7空载体和连着我的基因的重组载体,转化到AH109,在-Trp的固体培养基上能长,但是在-Trp的液体培养基上,摇16-20小时,都几乎不生长,培养基还是清澈的。 你的问题是怎么解决的啊?

你好,不知道你能不能给我点AH109菌株,我也做酵母双杂交,可惜一直没有找到需要的菌种,帮帮忙咯!
生活就像一盒巧克力,你永远不知道下一颗是什么味道。
6楼2012-12-16 11:06:31
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