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hejiansgbo

新虫 (小有名气)

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[求助] 请问下，我该怎么样去调整我的梯度呢？

黄酮高效液相提取洗脱
我是做黄酮提取的，将原料用超声波辅助提取，温度60℃，提取液为60%乙醇，然后过滤，取滤液过0.45um膜，流动相A甲醇，B0,1%甲酸。梯度洗脱0min 5%A 10min 10%A 20min 40%A 25min 40%A 30min 60%A 35min 60%A 45min 90%A 47min 100%A 60min 100%A ,这样跑出来的峰只是在三分钟左右有一个峰（有点像溶剂峰，但是峰很高，后面还有小峰，没分离开）还有就是在50-60分钟有一些峰，请问下，我该怎么样去调整我的梯度呢？

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催化版上2008-04-25前沸石分子筛，ZSM-系、SAPO-系共466个话题集锦已经有110人回复

1楼 2012-03-06 15:52:22

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xiaoxiao_2006

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

同意2楼的意见，你的样品主要成分是60%乙醇提取出来的，梯度初始浓度可以提高一些，不然3-50min之间太浪费了。不知道你的50~60min之间的峰分离的怎么样，你可以先只设置一个梯度（比如0-30min，A45%-100%）看一下主要成分的峰分布情况，再针对个别分离不好的峰调整梯度。建议摸索条件的过程中，不要一开始就设置那么细的梯度。