| 查看: 2960 | 回复: 13 | |||
jingdejun铁杆木虫 (小有名气)
|
[求助]
引物设计的问题
|
|
先说明一下，我是在前人的基础上做的实验，但是这个基础有点不扎实（因为她不是很懂分子方面的东西，为了毕业论文才硬着头皮做的）。 她利用真菌的通用引物从出发菌株（自己筛选的，后来鉴定出来是产黄青霉菌）中克隆出了一个核酸片段（号称是脂肪酶，因为原始菌株有脂肪酶活性），并且已测序。我就是在这个序列的基础上开展我的工作。我要做的是克隆和真核表达这个基因。 首先要设计引物。而第一步就是要找出保守序列。我通过ncbi的blast，发现此序列中只有一个保守区段（在上游），所以上游引物可以根据这个保守区段设计。 可是下游引物应该怎样办呢？ 再就是即便我克隆出了这个片段，我怎样确定它就是对应的脂肪酶的基因呢？ 本人第一次求助，希望可以得到帮助啊，谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有72人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
liuyu_sdili
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 3045.9
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 394
- 在线: 311.7小时
- 虫号: 1130112
- 注册: 2010-10-23
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2012-03-06 15:22:20
jingdejun
铁杆木虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 5495.6
- 红花: 2
- 帖子: 218
- 在线: 87.4小时
- 虫号: 1232093
- 注册: 2011-03-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2012-03-06 16:13:05
liuyu_sdili
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 3045.9
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 394
- 在线: 311.7小时
- 虫号: 1130112
- 注册: 2010-10-23
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2012-03-06 19:55:58
jingdejun
铁杆木虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 5495.6
- 红花: 2
- 帖子: 218
- 在线: 87.4小时
- 虫号: 1232093
- 注册: 2011-03-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2012-03-06 20:53:02
liuyu_sdili
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 3045.9
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 394
- 在线: 311.7小时
- 虫号: 1130112
- 注册: 2010-10-23
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good！ 2012-03-07 12:20:10
西瓜(金币+3): Good！ 2012-03-07 12:20:10
|
这是两个不同的概念。 巢式PCR见http://baike.baidu.com/view/688277.htm。 TAIL-PCR见附件文献。 TAIL-PCR 中需要用到巢式PCR，但两者并不等同。 |
» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 一种DNA侧翼序列分离技术_TAIL_PCR.pdf
2012-03-06 21:35:03, 1.23 M
6楼2012-03-06 21:35:07
jingdejun
铁杆木虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 5495.6
- 红花: 2
- 帖子: 218
- 在线: 87.4小时
- 虫号: 1232093
- 注册: 2011-03-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
7楼2012-03-07 00:16:35
匿名
用户注销 (正式写手)
- 应助: 128 (高中生)
- 金币: 4550.4
- 散金: 50
- 红花: 22
- 帖子: 934
- 在线: 645.1小时
- 虫号: 0
- 注册: 2011-10-17
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
8楼2012-03-07 09:03:01
jingdejun
铁杆木虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 5495.6
- 红花: 2
- 帖子: 218
- 在线: 87.4小时
- 虫号: 1232093
- 注册: 2011-03-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
9楼2012-03-07 12:00:29
10楼2012-03-07 16:40:43
30