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梁小云632

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR CT值很高怎么办??

Sample Text各位前辈我在做qPCR,用的是ABI7900机子,试剂盒是罗氏13850001.。
在做qPCR前做过普通PCR,扩增得很好,带很亮,也无杂带
我做了5个基因,1个Actin和4个目的基因,3个模板,96孔板,25微升体系,SYBR终浓度是1倍,cDNA原液、稀释10倍、稀释20倍分别加入2.5微升(cDNA是用invitrogen试剂盒合成的)
qPCR结果是Actin的CT值很高,未稀释的为22-28之间,稀释了的25-35左右,而且各个模板的CT值相差大。
目的基因的CT值也在25-35之间。
请问我这个问题应该怎么解决?????
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tuobaohua

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
梁小云632(金币+1): 有帮助 2012-03-02 15:45:01
2楼2012-03-01 10:53:26
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梁小云632

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by tuobaohua at 2012-03-01 10:53:26:
http://www.genecool.com/thread-25581-1-1.html
http://protein.dxy.cn/bbs/topic/22139571

参考下这两个帖子

谢谢哈~~!
3楼2012-03-02 14:10:32
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doris0609

新虫 (初入文坛)

我的管家基因时好时坏的,求引物设计,我用的大鼠的
4楼2012-08-07 16:23:40
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