应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr产物琼脂糖凝胶电泳检测部分泳道到出现月牙状带型，求解？
201/2返回列表12下一页
查看: 5827  |  回复: 19
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者simon江将赠送您 1 个金币

simon江

新虫 (小有名气)

[求助] pcr产物琼脂糖凝胶电泳检测部分泳道到出现月牙状带型，求解？

pcr产物琼脂糖凝胶电泳检测部泳道到出现月牙状带型，注明：这八个泳道的产物同时扩增，只是DNA模板不同。求解


[ Last edited by simon江 on 2012-2-29 at 01:05 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘贴专辑推荐

PCR技术 分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-02-29 00:59:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shengxuejs

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电压过大，电流过大，出现了边界效应，使得DNA在泳动过程中的速率不均匀。

lz可以尝试：
1，微波炉制胶时用中火煮沸三次，一沸既止，摇匀再煮沸。
2. 适当减少电压与电泳时间。
3. 点样过程速度加快，避免弥散。

注意以上三点，应该能使得目前的状况得到改善。
赞一下(4人) 回复此楼
学无止尽，沧海扁舟。
18楼2012-03-13 10:40:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bst5

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
两点原因
第一：胶没有混匀
第二：梳子没有拔好，建议先把胶倒上，再插梳子
赞一下(3人) 回复此楼
7楼2012-02-29 14:46:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiayongxiu

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我有时候跑胶也会跑的很差，师兄说要做一块好胶，首先得让琼脂糖充分溶解，可以多加会儿热，摇匀后在加热，直到溶液澄清没有颗粒状为止；还有就是电压可能太大。你可以重做一块胶试试，换上新的电泳缓冲液。
赞一下(3人) 回复此楼
一切都要靠自己努力
8楼2012-02-29 15:21:00
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaolijuan913

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

要经常用紫外灯看看，别跑过了，一般20分钟左右就跑开了
赞一下(2人) 回复此楼
nothing
17楼2012-03-01 12:39:45
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2012-02-29 18:02:25
月牙形集中在胶的下部，跑着跑着就弥散了，是不是跑的时间太长了捏？注意电流不要太大，缓冲液刚刚没过胶最好了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-02-29 09:20:37
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cgspider

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们经常叫 牛角 状，是因为电压太大了。。
赞一下(1人) 回复此楼
你的能力撑不起你的野心
15楼2012-03-01 10:33:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaolijuan913

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1%的胶，10v/cm，上样5ul，你试试。这是我跑胶用的条件，几乎没见过月牙，祝你成功
赞一下(1人) 回复此楼
nothing
16楼2012-03-01 12:38:14
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2012-02-29 18:02:31
楼上的点样孔应该是在底部吧？
怎么这么多条带？条带范围从多少到多少？你胶浓度是多大？
月牙状也没不是没见过，但挺奇怪的是你同一泳道上有些是月牙有些很正常。难道跟上样量有关？
赞一下 回复此楼
伟大航线....
3楼2012-02-29 09:40:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vickie20

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电压或者电流太小？如果是太大应该是微笑型……
赞一下 回复此楼
4楼2012-02-29 10:22:25
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eagle00768

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by longrna at 2012-02-29 09:40:03:
楼上的点样孔应该是在底部吧？
怎么这么多条带？条带范围从多少到多少？你胶浓度是多大？
月牙状也没不是没见过，但挺奇怪的是你同一泳道上有些是月牙有些很正常。难道跟上样量有关？

同一泳道上有的正常，有的月牙，是不是因为正常的条带浓度低，月牙状的浓度较高，我觉得应该是电压大的原因
赞一下 回复此楼
5楼2012-02-29 13:36:34
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by eagle00768 at 2012-02-29 13:36:34:
同一泳道上有的正常，有的月牙，是不是因为正常的条带浓度低，月牙状的浓度较高，我觉得应该是电压大的原因

有道理。
其实电泳不难，多看看参考marker公司跑marker的条件就可以了，关键要细心。
赞一下 回复此楼
伟大航线....
6楼2012-02-29 14:11:27
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

simon江

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-02-29 09:20:37:
月牙形集中在胶的下部，跑着跑着就弥散了，是不是跑的时间太长了捏？注意电流不要太大，缓冲液刚刚没过胶最好了

电泳条件：5v/CM,电泳时间：4.5小时
赞一下 回复此楼
9楼2012-02-29 15:49:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

simon江

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by longrna at 2012-02-29 09:40:03:
楼上的点样孔应该是在底部吧？
怎么这么多条带？条带范围从多少到多少？你胶浓度是多大？
月牙状也没不是没见过，但挺奇怪的是你同一泳道上有些是月牙有些很正常。难道跟上样量有关？

是的，点样孔在底部，这个是用sts标记的，胶是2%的，上样量6.5ul，整个pcr体系是20ul
赞一下 回复此楼
10楼2012-02-29 15:50:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 simon江 的主题更新
201/2返回列表12下一页
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 试用期辞职 +11 ZHONGWU_U 2024-06-18 20/1000 2024-06-23 08:26 by shl2112501
[有机交流] 求助 10+7 脂质纳米粒 2024-06-20 9/450 2024-06-23 07:52 by buhui7829
[硕博家园] 怎么带研究生？ +17 豆豆小小2 2024-06-20 18/900 2024-06-23 00:14 by renxiangdzkd
[公派出国] CSC博士联培对将来就业有用吗 +3 也就这样 2024-06-22 3/150 2024-06-22 22:04 by 326lhpqk
[教师之家] 复旦夏同学提出高校成年人学生退学不应该让家长审核，大家认同吗？ +8 苏东坡二世 2024-06-22 15/750 2024-06-22 21:37 by 我爱夏天了
[金属] EBSD的解析率只有10% +3 wallace6666 2024-06-20 6/300 2024-06-22 19:55 by EBSD
[有机交流] 高温酯化反应喷料 20+3 hl24678 2024-06-21 5/250 2024-06-22 16:37 by zyp0009928
[基金申请] 江南大学到瑞士招聘，称取消非升即走，改预聘+长聘 +24 babu2015 2024-06-18 29/1450 2024-06-22 16:29 by 风今25
[教师之家] 复旦夏同学退学理由说明，哪儿可以下载？ +6 苏东坡二世 2024-06-21 7/350 2024-06-22 13:50 by chemhua
[基金申请] 青年和面上，哪个上会难度更大 +12 今晚推荐22 2024-06-21 15/750 2024-06-22 12:12 by 今晚推荐22
[博后之家] 在国内某高校做全职博士后2年，现在找到新的单位，出站或退站对新工作有什么影响？ +10 nxplfcc 2024-06-20 10/500 2024-06-22 07:52 by 徐长安
[基金申请] 刚刚收到科研之友邮件 +25 olivermiaoer 2024-06-19 38/1900 2024-06-21 18:46 by 6543yes
[论文投稿] ACS 编辑的意见 10+3 哈哈妞1993 2024-06-20 3/150 2024-06-21 17:06 by 投个论文
[基金申请] 我标书代码变了 +63 学员NHuqdk 2024-06-16 86/4300 2024-06-20 22:03 by 841790061
[论文投稿] 第一篇论文投稿进程记录 +4 慎独的小花卷 2024-06-20 9/450 2024-06-20 20:37 by 慎独的小花卷
[有机交流] 想要用氢化钠拔掉吲哚N上的氢取代酰氯 50+3 光敏剂 2024-06-19 4/200 2024-06-20 18:41 by HF111001
[基金申请] 青年基金会评专家到底是怎么会评的呀？主审专家是不是一般不会改动系统按函评给的顺序 5+4 他山攻玉之石 2024-06-18 18/900 2024-06-20 16:33 by 他山攻玉之石
[论文投稿] 投稿求助 +4 平凡的日子 2024-06-19 5/250 2024-06-20 16:24 by yueyueyue@
[基金申请] 太卷了 +14 laoyuefubio 2024-06-17 27/1350 2024-06-20 09:52 by htjwqy
[基金申请] 博后基金刷到的BUG,图片来的更直观 +15 carolloo 2024-06-17 16/800 2024-06-19 09:42 by msjy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭