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lirenshi

木虫 (小有名气)

[求助] 姜黄素&HPLC

我将姜黄素纯品进高效液相(安捷伦1200),选取检测波长210nm、260nm和380nm,发现其紫外响应值均很低,增加样品浓度情况也没有很大改变。姜黄素的最大吸收波长在425nm,可仪器的检测范围只是200-400nm,请问该如何解决这一问题?
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airmeteor

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们这的也是安捷伦1200的液相 紫外检测器可以安装一个用于检测可见区的灯 这样可以测425nm的了。再有,姜黄素有很强的荧光,我们测姜黄素就用荧光检测器,检测线基本到纳克级别了,另外用液质测也可以,响应很好。
9楼2012-06-28 14:37:22
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lirenshi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 美鬼臼 at 2013-04-04 20:14:41
请问我用荧光检测出了很多峰(真的很多!),流动相:乙腈和4%醋酸,总有三个峰连在一起,不知道是同一个峰分裂的还是是三个物质峰没分开?...

你的姜黄素是买的吗?几十块钱好几克的那种?要是是这样的话 那可能是因为 买的这种姜黄素实际上包括姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素 所以才成三个峰  或者是姜黄素的烯醇互变导致的液相呈三个峰
14楼2013-04-05 10:52:31
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普通回帖

冀州王月风

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与交流 2012-02-27 20:40:02
lirenshi(金币+1): 有帮助 2012-02-28 18:08:55
425nm不属于紫外波长了啊,所以不能用紫外检测器了。换别的检测器试试,希望尅帮到你。
2楼2012-02-27 18:22:14
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lirenshi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 冀州王月风 at 2012-02-27 18:22:14:
425nm不属于紫外波长了啊,所以不能用紫外检测器了。换别的检测器试试,希望尅帮到你。

恩 那请问换什么检测器啊?
3楼2012-02-27 18:37:58
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
lirenshi(金币+1): 有帮助 2012-02-28 18:08:42
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-28 18:37:18
lirenshi(金币+1): 有帮助 2012-02-29 09:42:12
值得注意的是:姜黄素在溶液中会以“1,3-二酮”与“烯醇”平衡混合物形式存在,HPLC有可能会出现两个峰,且紫外吸收有差异。

紫外响应值不应该低,没选好适当的检测波长?
4楼2012-02-28 14:58:43
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lirenshi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by wangfei.ac at 2012-02-28 14:58:43:
值得注意的是:姜黄素在溶液中会以“1,3-二酮”与“烯醇”平衡混合物形式存在,HPLC有可能会出现两个峰,且紫外吸收有差异。

紫外响应值不应该低,没选好适当的检测波长?

这个互变我是知道的,液相上也确实如此,检测波长我同时选择210nm、260nm和380nm,响应值均很低。请问这是怎么回事?还有好像姜黄素见光分解,这又为何?谢谢
5楼2012-02-28 18:13:45
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)


xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-29 18:34:00
引用回帖:
5楼: Originally posted by lirenshi at 2012-02-28 18:13:45:
这个互变我是知道的,液相上也确实如此,检测波长我同时选择210nm、260nm和380nm,响应值均很低。请问这是怎么回事?还有好像姜黄素见光分解,这又为何?谢谢

我们单位有姜黄素及其一些类似物,除了发现有烯醇异构化外,化学稳定性还是不错的。
至于响应值均很低,是因为这个产品在210-380之间没有较明显的紫外吸收,只有一个显著的强吸收在425nm,应该选用该波长检测才会获得高灵敏度。
6楼2012-02-29 08:43:55
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dxqqin

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-15 19:57:27
换个机子检测吧,姜黄素吸收一般在425nm。一般于棕色容量瓶中4度存储可以一周左右。希望对你有帮助。
7楼2012-04-15 19:48:26
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herbzuo

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 3Q 2012-04-16 01:45:26
是的,姜黄素最大吸收波长就是425nm。你得换一个检测器。
永远不要低估一颗坚强的心。
8楼2012-04-15 21:55:54
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

用PDA检测器就可以了,你的agilent就是DAD检测器
10楼2012-07-02 13:46:00
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