24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 8056  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

吉林农大

木虫 (小有名气)

[交流] 如何在蛋白纯化后去除6组氨酸(6His)标签 已有13人参与

为了对表达的蛋白进行后期纯化,就连入了相应的6组氨酸标签,这个标签与蛋白之间是如何接合的呢(Linker还是直接融合),接合后在蛋白过柱纯化时,又是如何得到没有6组氨酸标签的目的蛋白呢!这些问题,大家是怎么考虑的呢!
因为有的时候表达一种蛋白是要考虑到其空间构象的变化的,所以在表达成功后,一定要去除上面本来没有的东东,标签就是一个例子!

[ Last edited by 吉林农大 on 2012-2-23 at 01:11 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我靠
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

果断悉尼

铁杆木虫 (知名作家)

三沙市名誉常务副市长

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
不是有专门去除标签的酶吗?
或者当初设计的时候可以不设计标签的哦
我的微信号happyjk5208,谢绝闲聊
6楼2012-02-23 10:50:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
组氨酸标签对空间结构影响一般较小,所以一般采用直接融合。
在标签与蛋白之间加上蛋白酶酶切位点,比如肠激酶酶切位点,纯化后用蛋白酶酶切除去组氨酸标签。
2楼2012-02-23 07:46:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一毫升的枪

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
小丹木木(金币+1): 鼓励 2012-02-23 10:06:11
有些载体,例如pet28a上面就带有His标签的,你如果用载体带的标签,中间的那段linker上有thrombin 的酶切位点,可以表达纯化后切掉
4楼2012-02-23 10:01:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

馋猫

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
小丹木木(金币+1): 鼓励 2012-02-23 13:51:44
很多载体是有酶切位点的,除了一些特殊的蛋白不能用his,大多数都没影响
如果你要切掉his的话,推荐不要用带有his 的载体
不如直接换gst,mbp之类的载体,纯化效率更高,纯化之后酶切掉tag
5楼2012-02-23 10:43:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +3 IceGuo 2026-03-26 4/200 2026-03-27 05:35 by user003
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 一志愿华理,数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 10/500 2026-03-26 22:37 by 学员8dgXkO
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 329求调剂 +5 1() 2026-03-22 5/250 2026-03-26 20:40 by fmesaito
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 材料求调剂 +4 .m.. 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:30 by peike
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 求调剂 +6 研研,接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
请填处理意见