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ding_winnie无虫 (小有名气)
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[求助]
关于测序
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各位大侠，有木有人知道测序公司的测序原理？突然很好奇。。。求指点。。。 |
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2楼2012-02-22 21:18:10
ding_winnie
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3楼2012-02-23 09:20:53
【答案】应助回帖
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小丹木木(金币+2): 鼓励应助，很详细了 2012-02-23 13:55:56
小丹木木(金币+2): 鼓励应助，很详细了 2012-02-23 13:55:56
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用的是双脱氧终止法测序反应， 其原理:在包括DNA聚合酶、DNA模板、单链寡核苷酸引物、4种dNTP（dATP、dGTP、dTTP和dCTP）及 4种ddNTP（ddATP、ddGTP、ddTTP和ddCTP）的测序反应体系中，DNA聚合酶在模板链指导下，不断地逐个将dNTP加到引物的3’-OH末端，使引物延伸，合成出新的与模板互补的DNA链。在链的延长过程中一旦加入双 脱氧核苷三磷酸（ddNTP），由于其双脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基，不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，链终止延伸。形成一系列具有相同5’-引物端和以ddNTP残基为3’端结尾的长短不一的片段的混合物，通过毛细管电泳并经过分析从而获得模板DNA的核苷酸序列。 |
4楼2012-02-23 12:07:04
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