24小时热门版块排行榜    

查看: 4592  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

[交流] 考马斯亮蓝测定蛋白的结果受蛋白的分子量大小的影响吗? 已有7人参与

研究表明,考马斯亮蓝测蛋白的主要机理是,考马斯亮蓝能够与蛋白中的碱性氨基酸结合,那么我想问测定结果是否受蛋白的分量的影响比如说蛋白经过一定程度的水解,原始蛋白与不同水解程度的蛋白、完全水解后的氨基酸溶液是否一致?分子量超大的蛋白,是否会因为其复杂的结构,考马斯亮蓝无法与藏在蛋白内部的碱性氨基酸结合而结果偏低?如果测定结果受分子量的影响的话,是不是说所测蛋白的分子量必须某个该范围内,比如说在牛血清蛋白分子量(所采用的的标准物质,68kDa)上下多少范围内,才能够采用该方法定量测定?如果不是在这个特定的范围内,是不是所得蛋白的含量只能是相对的,只能在同一种测定方法,同一种测定目标之间进行比较,比如说啤酒,采用BCA或者Lowry与此方法所得结果之间没有可比性,而同样采用考马斯亮蓝法测定的啤酒和麦汁中蛋白的结果间也不具有可比性?
实际上,我只是想测多肽含量,参照大豆肽粉的行业标准,但是不想用凯氏定氮,想用一种更便捷的测定多肽和游离氨基酸总量的方法,然后再扣除游离氨基酸的含量。如果说考马斯亮蓝法只是无法测定游离氨基酸的量,那么我就可以直接用这种方法测定了,如果说某个分子量一下的多肽都测不出来,比如说2KDa,我就不能用这种方法。
有一篇文献里测多肽也是用的这种方法,可是想想又有诸多不妥。
想了这么多,考马斯亮蓝这种方法,好像不是一种十分精确的方法,需要探讨的东西很多?
问问各位大中小牛们,你们有没有过这样的想法或做过类似的试验?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

研究僧
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wujia115

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
应该是受到分子量影响的,例如测定蛋白和小肽时的溶液颜色就不一样。
6楼2012-02-24 10:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

引用回帖:
: Originally posted by 14790087509 at 2012-02-22 18:48:32:

LZ很纠结的。。。
研究僧
3楼2012-02-22 19:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑色月光

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
测小肽用福林酚法好了,这个还是可以的……另外,考马斯亮蓝法测蛋白时,分子量小的多肽好像测不出来,这个是我师姐做类似实验的经验……凯氏定氮误差大、时间长,不好用的,不过你可以用它测总蛋白
4楼2012-02-23 12:34:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

roydxy

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
的确很纠结!
建议多种方法都尝试一下,找出最适合自己实验的,单纯理论讨论…没结果
5楼2012-02-23 23:00:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上意见出来了 +6 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 12/600 2026-08-29 17:20 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-29 16:49 by zICmwzsBXjbN
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 14:03 by jCd0dEvKHShX
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 11:49 by jCd0dEvKHShX
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:29 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +3 349506619 2026-08-28 3/150 2026-08-29 10:49 by 木风9012
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
请填处理意见