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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DH5a 感受态细胞制备问题
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ixido

木虫 (小有名气)
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小丹木木(金币+2): 呵呵，结果好就好了 2012-02-18 08:19:12
肯定是要把冰盒放进去的，感受态制作过程中保持低温是最重要的。
无菌操作是说你使用的东西要无菌，操作在酒精灯火焰附近就可以了。楼主可以考虑一下把冰盒和操作区域分别不知在超净台的左右两个部分，距离略微远一点。
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11楼2012-02-17 16:05:34
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
这个肯定需要无菌操作吧，我们就是弄个比较小点的冰盒，直接放超净台，其实也挺方便的
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勤奋、执着、专注，则无坚不破。
12楼2012-02-17 17:17:02
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wucs27

铁杆木虫 (小有名气)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+2): 一切以实验结果为目的就好了，呵呵 2012-02-18 08:18:15
制作感受态时没必要无菌操作，我都是在试验台上操作。即使有个别细菌能进入离心管，数量上也不占优势；而且，转化后的细胞是生长在选择培养基上，如各种抗生素等，这些偶尔感染的杂菌也会被选择掉，所以，没必要无菌操作。
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13楼2012-02-17 17:26:13
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wzqno

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
其实无所谓的，反正最后涂版的时候板子是加抗生素的，不过一开始摇菌一定是无菌环境
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14楼2012-02-17 20:00:59
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watercity

金虫 (小有名气)
楼主没有做过组织培养么？按照组织培养的要求来做，遵循无菌操作规范就可以了。
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15楼2012-02-18 14:53:23
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scienzyme

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2012-02-18 21:49:32
把质粒加到感受态细胞的操作可在外面进行，但其他涉及到菌体的操作都应在超净台内。冰盒也要放在超净台内。
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16楼2012-02-18 20:34:15
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gaga123

木虫 (小有名气)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by thaw at 2012-02-17 12:23:04
无所谓了转化也是在外面操作的，但是摇菌是一定要超净台的

弱弱的问一句，没理解你这句话的意思，“转化也是在外面操作的，但是摇菌是一定要超净台的”。。。。转化实验可以在外面操作吗？。。。。其实我担心的是，今天我做转化实验时，在加入无抗性培养基本37度摇床使菌复苏之后，拿出来的时候，不小心把管的盖子打开了，不知道对实验的影响大不？需要重新做转化吗？

[ Last edited by gaga123 on 2012-9-14 at 17:02 ]
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17楼2012-09-14 16:55:01
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力攻

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感受态就是考查你的无菌操作，以及注意步骤。
在冰上时尽量不要开盖以及不要点着酒精灯，要让感受态细胞成为自己的孩子，要小心呵护
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18楼2013-02-28 18:48:01
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