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mengyl2004

铜虫 (小有名气)

[求助] 急!!T淋巴细胞转化试验

最近要做T淋巴细胞转化率的试验,看了一堆东西,有几个疑问希望哪位大侠给指点下。

1、我看的MTT法啊,MTT培养结束后有加SDS-HCl 溶解结晶的,也有加DMSO的,也有加HCl-异丙醇的,请问有什么差别吗,哪个效果更好呢。

2、比色波长 :试验最终比色时,怎么有人在490nm下比色,有的在570nm下比色呢,是什么原因导致比色波长不同吗

4、据说CCK-8方法比MMT方法比较来说,根据实际操作感受,CCK-8比MMT更好操作吗,价格方面会贵很多吗

3.我做的实验是考察一些添加剂对蛋鸡的免疫指标的影响,各种文献中有很多指标。可以按照反映免疫功能的准确性或者重要性将各指标排个顺序码,比如血液中IgA、IgM、IgG、T淋巴细胞转化率、B淋巴细胞转化率、CD3、CD4、CD8、各种细胞因子、新城疫禽流感等抗体效价

4.抗体效价、抗体滴度、抗体水平是有什么差别吗,还是同一个东西。
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mengyl2004

铜虫 (小有名气)

哦,还有呢,我给鸡采血后必须得马上做淋转试验吗,可以-20或者-80℃保存之后再测吗,或者最好多长时间之内来做淋转试验呢
2楼2012-02-14 17:14:42
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alfred2008

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
据说采血后需马上做T淋巴细胞转化实验,学兽医的同学应该比较清楚,我们学畜牧的都是一知半解,赶紧请教一下兽医的同学吧!

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夫天地为炉兮,造化为工;阴阳为碳兮,万物为铜!
3楼2012-02-15 22:36:29
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alfred2008

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我们学校这边条件有限,有些实验没有做,有些也不能测。如果你们那边有流式细胞仪的话,应该能测很多免疫指标。
对于免疫指标来说,估计没有什么先后顺序,一般得找到你所用添加剂的敏感指标,常见的也就是IgA、IgG、白介素、补体、禽类的法氏囊等等,请教一下免疫学老师或预防兽医的同学吧。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

夫天地为炉兮,造化为工;阴阳为碳兮,万物为铜!
4楼2012-02-15 22:42:13
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mengyl2004

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by alfred2008 at 2012-02-15 22:36:29:
据说采血后需马上做T淋巴细胞转化实验,学兽医的同学应该比较清楚,我们学畜牧的都是一知半解,赶紧请教一下兽医的同学吧!

谢谢啊
5楼2012-02-16 08:27:51
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mengyl2004

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by alfred2008 at 2012-02-15 22:42:13:
我们学校这边条件有限,有些实验没有做,有些也不能测。如果你们那边有流式细胞仪的话,应该能测很多免疫指标。
对于免疫指标来说,估计没有什么先后顺序,一般得找到你所用添加剂的敏感指标,常见的也就是IgA、 ...

谢谢啊
6楼2012-02-16 08:29:54
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caixuan1985911

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1. SDS或DMSO都可以,SDS溶用570nm测,DMSO溶用490nm测,我个人比较喜欢用SDS,感觉比DMSO做出来的稳定;
2.建议参考http://www.bioon.com.cn/protocol/showarticle.asp?newsid=3311。我们这里一般还是用MTT;
3. 这些指标可能都有elisa试剂盒测,成本比较高,你根据自己的实验需要,有选择性的去做。我一贯的观点是做实验不要堆砌数据,要每个数据都能为分析服务。
7楼2012-06-07 14:45:59
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sxndliujing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

采血后应该马上做,既然你养细胞就应该知道,细胞离开了适合生长的环境,活性很容易下降甚至死亡,不仅应该马上做,而且应该快。
抗体效价、抗体滴度、抗体水平应该是一个意思,但不一样,滴度和效价之间好像有一个换算公式(因为是师兄做的,我也不是很清楚),抗体水平应该是根据滴度或效价对免疫的一个评价。
我爱科学
8楼2012-09-07 09:19:04
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invert_bell

铁虫 (初入文坛)

有两种测定方法:形态学检查法,3H--胸腺嘧啶核苷渗入法,
我今年也要测,可是不好测,想送出去测,没找到能测的地方
9楼2015-04-03 15:57:49
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