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The mobile phases con¬sisting of methanol and water were not efficient enough to clearly separate all fractions. Using a mobile phase with acetonitrile as a non-polar solvent resulted in a better sep¬aration of different peaks, where the actual volume fraction of acetonitrile depended on the analyzed samples. We first analyzed LFP obtained after in vitro incubation of mito¬chondria with MDA at 25 °C. Comparing the chromato¬grams obtained with different volume fractions of acetonitrile used, it was found that mobile phase made of 60% acetonitrile, v/v, gave the best separation of individual peaks. Using the same procedure we found that the best separation of LFP from mitochondria incubated with MDA at 50 °C was with 40% acetonitrile, v/v. |
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2楼2012-02-14 15:42:54
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xiaoqihu
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9楼2012-02-14 16:37:00
sally88814
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麦兜Magic(金币+80): ★★★很有帮助 2012-02-14 17:32:43
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甲醇和水的流动相条件不足以明确分开的其中所有份数。 使用非极性溶剂乙腈作为流动相能够得到较好的分离峰，其中乙腈的实际体积分数取决于分析样品。 我们在首先分析了在温度为25 °C时，在使用丙二醛的条件下，线粒体的体外孵育后，得到了类脂褐素。 我们通过比较由不同体积分数的乙腈流动相得到的色谱图，发现当流动相中有体积分数为60%的乙腈时，能够得到最佳的分离峰。 使用上述步骤我们发现分离在温度为50 °C时，在使用丙二醛的条件下，从线粒体的体外孵育得到的类脂褐素的最佳的分离峰是流动相中有体积分数为40%的乙腈. |
10楼2012-02-14 16:37:40