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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何用溶酶体破碎细菌细胞壁？？
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自由飞翔329

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何用溶酶体破碎细菌细胞壁？？

我打算用溶酶体破碎细菌细胞壁，可是没有做过相关实验，所以想请教各位高手：如果我用溶酶体，应该用什么缓冲溶液？每克细菌需多少缓冲溶液？溶酶体适宜的用量？还有我看有的人说是用温浴，有的人用冰浴，哪种方法好一些啊？同时我觉得单用溶酶体破碎细胞壁可能破碎的不完全，我能不能溶酶体溶解后结合渗透压冲击法破碎细胞？恳请各位高手多多提出宝贵意见啊！！
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1楼 2012-02-13 16:40:10
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xxtlxx

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
溶酶体？那是细胞器啊
你是说溶菌酶吧，工作温度4度到温浴（37度）都可以。很多时候用冰浴并不是考虑溶菌酶的活性，而是为了减少细菌裂解物中蛋白的降解。如果不是以获取蛋白为目的的温浴当然溶菌酶活性更高。溶菌酶配合压力、超声破碎效率更好是肯定的。
另外，不同细菌对溶菌酶敏感度相差很大，要具体分析了。
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2楼2012-02-14 07:01:22
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wjf008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
溶菌酶对革兰氏阳性菌的效果要好于革兰氏阴性菌。选择时应考虑。其他楼上已经说的很清楚了。
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3楼2012-02-14 09:27:37
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a198469327

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我想去除酵母菌细胞壁，想采用蜗牛消化酶和高压均质结合的方法，请问有用过蜗牛消化酶的吗？哪里有卖，反应条件如何？
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4楼2012-02-14 09:55:33
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自由飞翔329

新虫 (初入文坛)
自由飞翔329: 回帖置顶 2012-02-14 11:16:36
引用回帖:
楼: Originally posted by xxtlxx at 2012-02-14 07:01:22:
溶酶体？那是细胞器啊
你是说溶菌酶吧，工作温度4度到温浴（37度）都可以。很多时候用冰浴并不是考虑溶菌酶的活性，而是为了减少细菌裂解物中蛋白的降解。如果不是以获取蛋白为目的的温浴当然溶菌酶活性更高。溶 ...

对，是溶菌酶。我破碎细胞是为了得到蛋白，那这样的话得用冰浴了。还有用的时候得用什么缓冲溶液啊？是不是溶菌酶用量越高、作用时间越长，效果越好啊？
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5楼2012-02-14 11:07:14
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
37摄氏度。效果最好。
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微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
6楼2012-02-14 12:10:45
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longage.gene

银虫 (小有名气)
最简单的方法--French press！
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7楼2012-02-14 13:55:54
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chene

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
溶菌酶的条件应该有最适的情况，一般温度选在37度左右
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穷则独善其身，达则兼济天下。
8楼2012-02-15 19:34:28
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guoqiongjie

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by longage.gene at 2012-02-14 13:55:54
最简单的方法--French press！

能请问什么是French press吗？
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9楼2012-08-07 16:46:53
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