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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎样在表达载体质粒接上His tag标签
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duangongzi

金虫 (小有名气)

[求助] 怎样在表达载体质粒接上His tag标签

最近要做甜味受体蛋白的纯化与表达，想在表达载体pVRC 8400质粒上接一个His tag 标签，以利于与Ni2-NTA树脂纯化；但我不知道怎么在质粒载体上接His tag 标签，求助各位大侠，谢谢咯
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1楼 2012-02-13 11:36:09
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
duangongzi(金币+2): 2012-02-13 14:35:12
小丹木木(金币+2): good 2012-02-13 17:52:19
通过引物设计，在目标蛋白端加上His-Tag，也可将目标蛋白克隆到pet-28上
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2楼2012-02-13 12:09:48
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)

疯子

【答案】应助回帖

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duangongzi(金币+2): 2012-02-13 14:35:30
直接在引物设计的时候加到引物序列里面就行啦
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开开心心做科研，踏踏实实做好人。
3楼2012-02-13 13:02:35
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tanglian8655

金虫 (正式写手)
pET30a（+）上有这个标签的
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4楼2012-02-13 17:57:20
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tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
pET30a（+）上有这个标签的
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5楼2012-02-13 17:57:44
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东方龙飞

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
许多pET载体上都有His-tag标签，所以都还是可以用的，主力推荐当然是pET28a
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6楼2012-02-13 19:24:18
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
duangongzi(金币+2): 2012-02-13 21:17:10
duangongzi(金币+9): ★有帮助 2012-02-17 10:58:31
对 楼上说的主要两种  选择已有这种标签  第二 P出基因的引物里面加上这个标签。。。
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7楼2012-02-13 20:28:50
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bangcat

新虫 (初入文坛)
我是想在空质粒上加His-tag，想引物设计时候加在引物里，不知道如何设计引物
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8楼2018-03-14 19:15:17
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biology0551

新虫 (初入文坛)
同学您好，请问您能把pVRC 8400质粒的序列发给我看一下吗
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9楼2018-07-25 19:36:47
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