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介孔硅胶纳米粒的激光共聚焦实验问题
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188283828
金虫
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[交流]
介孔硅胶纳米粒的激光共聚焦实验问题
如题,在做介孔硅胶纳米粒的激光共聚焦实验上遇到了几个问题:
1,纳米粒聚集现象比较严重,是否有较好的解决方法?
2,纳米粒无法进入细胞,推测是聚集现象导致的或者是因为孵育的时间不够长?(因此想问问做过的人士,孵育多久合适?)
3,结果看上去纳米粒并没有进入细胞,但是却没被PBS洗掉,请教各位大牛如何彻底地清洗残留在细胞膜上的纳米粒。
不知道清不清楚,大概就是这样的。。
[
Last edited by 188283828 on 2012-2-11 at 21:57
]
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2012-02-11 13:54:06
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楼
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Originally posted by
liuanan
at 2012-02-13 14:49:20:
建议你了解一下confocal的成像原理
没懂你什么意思,你是说关于切面成像?但是那个只是光学意义上的横断面。
细胞外如果粘附纳米粒是会影响所成的像的。。。
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15楼
2012-02-13 16:44:52
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liuanan
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lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-12 16:06:38
表面修饰做了吗?水溶性咋样?
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2楼
2012-02-11 14:35:49
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2楼
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Originally posted by
liuanan
at 2012-02-11 14:35:49:
表面修饰做了吗?水溶性咋样?
做了氨基的修饰,水溶性较之前没有明显的变化。
但是纵观我做的所有的处方,水溶性都不是很好,只有个别的呈现分散的很好的状态。(我想您所说的水溶性是指分散性吧?毕竟硅胶也没法溶解在水里)
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3楼
2012-02-11 16:10:39
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188283828(金币+5): 很多思想就是我正在做的...非常感谢 2012-02-11 21:53:36
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-11 22:51:08
我觉得你的这个不能说在细胞膜上 或者说 没有进入细胞
蓝色细胞核纳米粒子一般式进入不了的 细胞核周围的还是有绿色的 反而可以说明可能进入细胞
你细胞的浓度太高,做这个细胞浓度低比较好,最好一个视野只有几个,细胞不要聚集,这样在白光视野下你可以方便看出细胞的边界。也就是说可以还叠加一个白光的视野。
孵育的时间 一般也不用太长,24小时差不多。
从你的图片上看,不能确定纳米粒子就聚集在细胞膜上,不要纠结纳米粒子吸附在细胞膜上,你用激光共聚焦,只有在一个平面上的光信号才可以进入检测器,实际相当于在细胞中间进行切片,你可以参考下标记细胞膜的染料,这样的染料在激光共聚焦显微镜下,就是细胞膜一圈。
稀释下细胞浓度,在做一次,就可以得到你想要的图片了。
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4楼
2012-02-11 19:32:38
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