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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 纳米生物材料 » 介孔硅胶纳米粒的激光共聚焦实验问题
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188283828

金虫 (小有名气)

[交流] 介孔硅胶纳米粒的激光共聚焦实验问题

如题，在做介孔硅胶纳米粒的激光共聚焦实验上遇到了几个问题：
1，纳米粒聚集现象比较严重，是否有较好的解决方法？
2，纳米粒无法进入细胞，推测是聚集现象导致的或者是因为孵育的时间不够长？（因此想问问做过的人士，孵育多久合适？）
3，结果看上去纳米粒并没有进入细胞，但是却没被PBS洗掉，请教各位大牛如何彻底地清洗残留在细胞膜上的纳米粒。

不知道清不清楚，大概就是这样的。。




[ Last edited by 188283828 on 2012-2-11 at 21:57 ]
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1楼 2012-02-11 13:54:06
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188283828

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by bioc at 2012-02-13 13:51:02:
你可以做confocal的Z轴切向扫描看看

谢谢您的回复，
我这次做的时候就会做Z轴切向扫描了，不过上面贴出来的图从我个人感觉上来说是确实没进到细胞的，毕竟离染出来的细胞核的距离都太远了。
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13楼2012-02-13 14:40:14
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liuanan

专家顾问 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-12 16:06:38
表面修饰做了吗？水溶性咋样？
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2楼2012-02-11 14:35:49
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188283828

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuanan at 2012-02-11 14:35:49:
表面修饰做了吗？水溶性咋样？

做了氨基的修饰，水溶性较之前没有明显的变化。

但是纵观我做的所有的处方，水溶性都不是很好，只有个别的呈现分散的很好的状态。（我想您所说的水溶性是指分散性吧？毕竟硅胶也没法溶解在水里）
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3楼2012-02-11 16:10:39
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huquan0_0

捐助贵宾 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
188283828(金币+5): 很多思想就是我正在做的...非常感谢 2012-02-11 21:53:36
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-11 22:51:08
我觉得你的这个不能说在细胞膜上  或者说 没有进入细胞   

蓝色细胞核纳米粒子一般式进入不了的  细胞核周围的还是有绿色的 反而可以说明可能进入细胞

你细胞的浓度太高，做这个细胞浓度低比较好，最好一个视野只有几个，细胞不要聚集，这样在白光视野下你可以方便看出细胞的边界。也就是说可以还叠加一个白光的视野。

孵育的时间 一般也不用太长，24小时差不多。

从你的图片上看，不能确定纳米粒子就聚集在细胞膜上，不要纠结纳米粒子吸附在细胞膜上，你用激光共聚焦，只有在一个平面上的光信号才可以进入检测器，实际相当于在细胞中间进行切片，你可以参考下标记细胞膜的染料，这样的染料在激光共聚焦显微镜下，就是细胞膜一圈。

稀释下细胞浓度，在做一次，就可以得到你想要的图片了。
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4楼2012-02-11 19:32:38
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