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魏慧芳

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问哪位高手用琼脂糖电泳跑过蛋白?

我用琼脂糖跑蛋白,条带总是拖尾,染色后条带前沿和加样槽之间形成蓝色的一片,长方形,这是为什么呢?还不像正常的拖尾,求高手指教!!!
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wang_zhen

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 魏慧芳 at 2012-02-10 14:07:17
太感谢了!我有一种蛋白,在pH8.6的时候,理论上应该带正电,跑向阴极,可我做的总是跑向阳极,实在想不出为什么?求指点!...

请问如果带正电的蛋白,留在胶孔没有跑动,是怎么回事呢?上样缓冲用的是溴酚蓝
9楼2013-05-23 10:58:13
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查看全部 11 个回答

lynni

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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小丹木木(金币+3): 鼓励应助 2012-02-09 13:35:37
一般使用琼脂糖凝胶电泳的都是DNA,电泳驱动力靠的是DNA骨架本身的负电荷。蛋白质电泳(一般指SDS-PAGE)一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷。都是负电荷,所以这两个电泳体系可以互相交换使用。进行大分子蛋白质电泳时,可以考虑换用琼脂糖凝胶,因为该体系孔径大。出现上述情况,是不是因为蛋白不够大根本跑不开?~~
淘喜欢的一切
2楼2012-02-09 00:16:08
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lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
为什么蛋白要用琼脂糖凝胶电泳来跑呢,我们都是用的聚丙烯酰胺凝胶电泳,建议尝试一下
我不管你看起看不起我,我都是个演员
3楼2012-02-09 08:01:50
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hxwhu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助哦 2012-02-10 13:38:29
样品要一样处理哦,加SDS加还原剂,缓冲液不能用TAE吧,要tris-glycine缓冲体系的,总之,感觉很怪,难道你不会做块垂直胶吗,琼脂糖胶那么厚,不好染不好脱
4楼2012-02-09 13:54:17
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