24小时热门版块排行榜    

查看: 1772  |  回复: 4

liuheluo

捐助贵宾 (小有名气)

[求助] 包涵体变性、复性

如题,最近表达一个蛋白,表达条件摸索过后发现还是全部为包涵体,故考虑采用变性、复性的方法。
结果有可溶性的蛋白,但是无活性,查阅文献发现,该蛋白需要一个辅基,且与该蛋白是共价结合
我不知道共价结合的辅基,是否即使我在复性过程中加入,也无法与该蛋白形成共价结合了呢?
是否意味着该蛋白无法变性、复性了呢?
请高手解答
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuheluo

捐助贵宾 (小有名气)

谢谢西瓜,不过我也不是新虫,就是不知道为什么之前那个木虫号密码居然能被盗,不得以就新申请了。。。
2楼2012-02-08 21:14:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+3): 鼓励应助,多多交流哦 2012-02-09 13:52:57
liuheluo(金币+2): ★★★很有帮助 谢谢,我再试试看吧,之前有个类似的酶可溶性表达了,这个就不行 2012-02-09 15:41:46
体外表达后的蛋白即使你加入辅基成分也不大可能形成有活性的酶分子,因为这一过程是在一些酶催化下完成的。建议你试试信号肽表达你的目标蛋白,包涵体变性复性方法可能不适合你。
再有你现在用的表达宿主能否使得你的目标蛋白与辅基共价连接还需要确定。
3楼2012-02-09 13:37:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ranger04

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以试试带有辅助溶解性标签的载体,比如pET32a等,得到tag-fusion目的蛋白之后用蛋白酶切点标签就可以了。
4楼2012-07-12 13:45:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

能否说说具体是什么蛋白?
太笼统不好交流的。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
5楼2012-07-12 14:53:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuheluo 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 wsYGJnURYvm6 2026-08-31 3/150 2026-09-01 01:52 by o3EMxHUAQDtS
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 wsYGJnURYvm6 2026-08-31 3/150 2026-09-01 01:40 by o3EMxHUAQDtS
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 4/200 2026-09-01 01:30 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
信息提示
请填处理意见