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qiuniao

铜虫 (小有名气)

[求助] 固相萃取淋洗有3步 分布收集

以前做一次SPE时候 淋洗是这样的 0.1M HCL ,甲醇,水。这一步整个收集下来发现目标物竟然有50%多
后来就想知道是淋洗中哪个环节损失了?
但是问题接踵而来:现在这三步里面均没有损失了。
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不要为旧的悲伤浪费新的眼泪
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padodo

至尊木虫 (职业作家)

胖嘟嘟

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
说的有点让人看不懂
50%多是在什么里面?还是三步淋洗合计?
是不是还有50%还在柱子上?
我有什么能帮助您的吗?
2楼2012-02-07 16:45:56
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by padodo at 2012-02-07 16:45:56:
说的有点让人看不懂
50%多是在什么里面?还是三步淋洗合计?
是不是还有50%还在柱子上?

是三步淋洗合计的50%的目标物
我把上样后的溶液也收集了 没发现目标物 那说明样品应该已经交换在柱子填料上了啊
不要为旧的悲伤浪费新的眼泪
3楼2012-02-08 10:35:50
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padodo

至尊木虫 (职业作家)

胖嘟嘟

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【答案】应助回帖

那是不是说明还有50%的分析物没有淋洗下来?
不知道你为什么要选择HCl、甲醇和水来进行淋洗?
如果是洗脱不完全的话可以改变洗脱液或者增加洗脱液体积

ps: 你说的淋洗是不是指洗脱?是elution还是washing?
我有什么能帮助您的吗?
4楼2012-02-08 11:08:23
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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是不是没有洗脱下来,洗脱液的强度不够
尽可能把你的目标物、spe柱类型规格,上样液、淋洗液、洗脱液等各个步骤说清楚
梦想、激情、灵感、体验--che
5楼2012-02-08 11:09:43
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by guevara1967 at 2012-02-08 11:09:43:
是不是没有洗脱下来,洗脱液的强度不够
尽可能把你的目标物、spe柱类型规格,上样液、淋洗液、洗脱液等各个步骤说清楚

目标物是一种小分子的氨基酸 有2个氨基
SPE柱子用的是Oasis MCX 混合型阳离子交换
上样液就是水样中加了已知浓度的标样(5ppm)
淋洗液用的是:0.1M HCL ,甲醇,水各3ml
洗脱液是8ml 5%氨化甲醇
还有请问一个问题:看文献中提到调整样品的pH ,是将待测样和标样混合后再调整到需要的pH吧?
不要为旧的悲伤浪费新的眼泪
6楼2012-02-08 13:28:08
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by padodo at 2012-02-08 11:08:23:
那是不是说明还有50%的分析物没有淋洗下来?
不知道你为什么要选择HCl、甲醇和水来进行淋洗?
如果是洗脱不完全的话可以改变洗脱液或者增加洗脱液体积

ps: 你说的淋洗是不是指洗脱?是elution还是washing?

我说的淋洗是washing 不是洗脱
不要为旧的悲伤浪费新的眼泪
7楼2012-02-08 13:29:00
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

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qiuniao(金币+4): 有帮助 2012-02-08 15:52:25
目标物是氨基酸,既有氨基又有羧基,你用的是阳离子交换MCX,所以上样液最好调至氨基酸带正电,上样后,淋洗顺序应是酸性水、水、甲醇,回收率只有50%,可能提示你需要提高洗脱液的强度,5%氨化甲醇大概是不行,用更强的碱液试试
梦想、激情、灵感、体验--che
8楼2012-02-08 14:28:42
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padodo

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胖嘟嘟

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西湖醉鱼(金币+1): 欢迎来分析版指导 2012-02-08 18:39:04
qiuniao(金币+4): 2012-02-10 15:40:40
看来大家都误会你了,大家都觉得淋洗是elution。
一般washing叫做清洗。

你的washing solution太强了,试试30%MeOH-水,不要用HCl
我有什么能帮助您的吗?
9楼2012-02-08 17:34:37
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by padodo at 2012-02-08 17:34:37:
看来大家都误会你了,大家都觉得淋洗是elution。
一般washing叫做清洗。

你的washing solution太强了,试试30%MeOH-水,不要用HCl

清洗时加0.1M HCL 是想保留碱性物质的
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10楼2012-02-10 15:10:05
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