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diy患者

铁虫 (正式写手)

[交流] “偷”taq酶质粒记 已有16人参与

这个帖子不知道发这里合适不,本来我是混水区的人,而且又多年不做实验。不过看到大家的讨论,感慨颇多,所以把6年前写得和分子生物学实验相关的故事写出来,大家随便看吧。

同宿舍一哥们,老板从国外“带来”一个产Taq酶的质粒,他是学生化的,想让他搞纯化,好挣点钱。我一听,眼红呀,我们实验室的Taq酶我刚来的时候没次只给几微升呀,要自己生产,那该多好呀,以后在用Taq酶的时候,用1ul,扔1ul,为啥,酷呗!可给我同学要质粒,这家伙居然不给,不过他也有他的苦衷,因为这个质粒本来来路不明,怕他老板知道引起麻烦。我只要干流口水。不过忘了哪天夜里突然想起一个办法,害的我半夜没睡着觉。原来我们实验室做感受态细胞出奇的高,好的时候据说能到十的八次方,你的Taq酶提的再纯,总会有那么一点点质粒吧,只要那么一点点,我就能转出来,于是给他要Taq酶,他当然乐意给,因为他想让我帮他实验效果如何。我把他乐呵呵给我的Taq酶转大肠杆菌,可前几次没转出来,我不死心,又要,而且要不是很纯的,嘿嘿,秘密只有我才知道,正所谓工夫不付有心人,居然转出来了,后来又诱导,有带!做PCR,你们猜怎么着,居然能做出来!!!太高兴了!!!!不过当时我的克隆早做完了,自己是用不上了,慷慨的给同学用吧,结果出了乱子。我一同学用我的Taq酶批了两个月,楞是没批出东西,而拿我的做正对照的,是很亮的,最后实在没办法,换商品的吧,结果出结果了。我真混呀,害的人家耽误了这么长时间,再加上毕业的时候把人家的留言册丢了,我都感觉自己成了历史罪人了。好了不说了,但我的Taq酶毕竟能扩出我的片段,还算成功。
创意指数:9.5,实用指数:8.5(本来打算写9,可害了人家我心里不舒服,降了0.5分)
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churchill87426

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
求制备高感受态细菌的Protocol...
求纯化方法...
谢谢!
感觉从蛋白里找DNA,有创意!
11楼2012-01-30 11:33:52
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
这事情。。。。。。。。。。。。。。。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2012-01-29 19:10:42
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diy患者

铁虫 (正式写手)

回复给我加分的amisking,谢谢先。
你说的”这个……“到底是啥意思?

我的”偷“是加引号的,无论我从道德和技术来说,都没有问题。
同学给我的是蛋白质,我提取出质粒来,你怨我不道德?再说我没有用于商业用途。
如果你认为我道德上有问题,请把您的加分收回吧,我不需要因为我打了这么多字而被加分,谢谢。

[ Last edited by diy患者 on 2012-1-29 at 20:07 ]
3楼2012-01-29 20:04:35
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diy患者

铁虫 (正式写手)

把我的这个老帖子发这里是因为前几天我看到一个帖子问,什么滤纸可以保存质粒。

感到大家的思维可能有点太僵硬,所以把我的这个故事拿出来讲讲。目的是炫耀自己吧,一般人只会把蛋白质当成蛋白质,而我却能看到里面作为杂志成分而存在的DNA,也就是质粒。用高转化率的细胞,把质粒找出来。
10的8次方的感受态细胞也是关键,一般的实验室手工是很难做出来的。
4楼2012-01-29 20:47:10
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