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银虫 (小有名气)

[求助] 拟南芥突变体问题

我有一个A基因的突变体   鉴定为纯合突变体,   本来我设计了一对这个基因的引物做定量PCR用,  但我用这对引物去扩增这个基因的纯合突变体时(模板为cDNA,提RNA时加了DNAase I 处理),也扩增出了一条目的带,送去测序,结果是这段序列是A基因的一段序列。但我理解突变体是纯合的T-DNA插入突变,应该没有这个基因的mRNA存在的呀,怎么一做反转录后扩增可以扩增出这个基因,不理解?求高手指点?
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银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by sxxuan at 2012-01-11 15:46:23:
可能是T-DNA插入突变对这个基因的转录没有影响,把整个插入当作异常蛋白给剪掉了。
我做的毕业论文也是这种情况,实在找不到原因了,师兄就给了我以上的解释。

如果转录不受影响的话,用此基因的全长引物扩增,以突变体的cDNA为模板,没有扩出带,这合理吗?
3楼2012-01-12 19:27:01
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银虫 (小有名气)

wizardfan: 请问你问题已解决没有?有的话,请对应助内容及时反馈是否有帮助(金币奖励) 2013-01-28 07:08:09
引用回帖:
5楼: Originally posted by 秋lover at 2013-01-24 20:24:40
楼主,虽然我不能回答你的问题,但是我想向你请教一下,突变数据是关于什么类型的数据啊?除了序列数据外,还有什么其它类型的数据吗?
有public能获取的吗?

关于你说的突变数据我不太明白你的意思,能说具体点吗?
6楼2013-01-26 20:21:10
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