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磁珠和抗体怎样连接?怎样证明连接成功?
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喵汪
银虫
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(幼儿园)
金币: 5541.2
帖子: 148
在线: 51.8小时
虫号: 851891
[交流]
磁珠和抗体怎样连接?怎样证明连接成功?
最近在做磁珠连抗体的实验,遇到好多问题。我们买来的是链霉亲和素修饰的磁珠,把抗体和生物素反应后,超滤离心,然后和磁珠反应。接下来的实验中磁珠贴壁现象非常严重,不知道是为什么呢?各位都用什么方法进行连接呢,我们也买了氨基和羧基修饰的磁珠。最好能说具体些,比如浓度啊比例啊。
还有非常想知道的一点,怎样证明磁珠和抗体连接成功呢?
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喵汪(金币
+1
):谢谢参与
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-01-08 10:17:36
我没做过这个,只是有点了解。
你磁珠没和生物素标记的抗体连接的时候,会不会也会发生贴壁的现象了。如果发生了,那就和生物素标记的抗体没关系。磁珠的问题,或者反应容器表面有什么东西的问题
如果是和生物素标记的抗体反应后才出现你说的现象,你考虑下生物素是不是标记多了,一般一个抗体上需要连接的生物素在3到4个左右,具体的你可以找网上找到一些资料,不易过多,也不宜过少。
要证明抗体和磁珠连接成功,你需要先荧光标记抗体,结合上抗体的磁珠会有荧光,不然就没有。
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2012-01-08 08:41:33
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