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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

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[求助] 从骨髓中分离造血干细胞

小虫想从大鼠股骨的骨髓中分离出造血干细胞（或者有核细胞），进行RT-PCR。但不知道应该怎样分离？愁死我了……希望大家给点建议啊~~谢谢了！！！

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1楼2012-01-06 20:11:34

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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by ht_235 at 2012-01-08 14:54:57:
1.077的就可以了……
这是我的专业问题

我感觉我大鼠的骨髓中有些块状的东西，且较致密……不知道是什么？您看我这样进行操作行否？
1、用生理盐水将骨髓冲到离心管中，进行离心。3000r/min,10min.收集细胞，弃上清。
2、将收集的细胞用约2ml生理盐水重悬，而后小心加到1.077约12ml的ficoll液中。
3、用带有水平转子的离心机进行离心，1500r/min,20min.
4、收集中间白色的细胞即为单个核细胞。
想向您请教一下：我的这个转速和时间可以吗？因为我的样品有限，不敢再用来做预实验了……谢谢您了！