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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 组织切片如何能够牢固地固定在载玻片上？
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duanbinxian

新虫 (初入文坛)

[求助] 组织切片如何能够牢固地固定在载玻片上？ 已有2人参与

我最近在做大鼠的器官组织切片染色。以前一直是将放置于防脱载玻片上的切片放入烘箱里面烘的方式来固定，但是后来要对切片做HE染色和普鲁士蓝染色，发现切片经常会被冲掉，很是苦恼。想请问一下有什么方法使切片固定地更牢固？明天打算将载玻片放在酒精灯火焰上炙烤，大家看是否可行？
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1楼 2012-01-04 19:03:27
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yourwish

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
看天(金币+2): 鼓励交流 2012-01-07 16:51:14
被冲掉的原因是：没有包埋好。估计原因之一是脱水不够。
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2楼2012-01-05 09:42:02
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神经再生

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
看天(金币+3): 鼓励回答 2012-01-07 16:51:30
首先感觉你是做的石蜡切片吧，用于石蜡切片的载玻片一般不需使用多聚赖氨酸包被，冰冻切片贴片后需要烤片机（55-60度）30Min+37度烘箱过夜或者烤片机烤片4-6小时，即可。染色的时候也要尽量避免直接冲刷样本部位
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也许似乎大概是，然而未必不见得。
3楼2012-01-05 10:48:42
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gorrylee

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
看天(金币+2): 鼓励回答 2012-01-07 16:51:43
实际操作中，石蜡切片的载玻片我们也使用多聚赖氨酸包被。掉片很平常，染色的时候也要尽量避免直接冲刷样本部位。
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4楼2012-01-07 08:11:40
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木木清月月鸟

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
5楼2013-06-23 21:37:40
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木木清月月鸟

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
6楼2013-07-11 22:24:24
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willychen34

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我也是这个问题，之前试过真空粘片法，效果一般，后来用这个文献上的方法 ：应用Steedman's wax切片法观察植物细胞微管骨架；你可以照着试试。一直感觉烘片会影响试验。。。
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所谓兵来将挡，水来土掩，总有一天，会实现的。
7楼2015-11-17 17:33:07
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mutant

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

假如你包埋的组织，能够不破裂，完整的切片，说明你前期的制作过程是没有问题的，切片的厚度不要超过10微米，切片厚了，后面操作容易掉片。
接下来个人觉的使用脱载玻片，然后60度烘箱烤片2h，这样可以使得组织很牢固的粘在切片上，还有在之后的操作过程一定要动作很温和。
这是我曾经做免疫组化时的经验，当时做组化还需要微波加热煮片，来修复抗原，这个过程其实是一个很剧烈的过程，我都按上面的步骤进行，没有问题的
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8楼2015-11-17 22:13:41
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