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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助革兰氏阳性菌的高效破碎方法
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欣如止水

金虫 (小有名气)

[求助] 求助革兰氏阳性菌的高效破碎方法已有1人参与

各位虫友，我在实验中遇到一个比较棘手的问题，应用超声破碎法破碎一株革兰氏阳性菌的效果非常差，只有相同条件下（6s,6s,99次, 400w）处理大肠杆菌的三分之一的效果。实验的目的是测定SOD、CAT等酶的酶活，因此既要顾及酶活性，又要追求高破碎效率。有在这方面进行过尝试的虫友帮帮忙。谢谢啊
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1楼2012-01-04 16:06:10
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fxgowen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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zhang8826857(金币+3): 鼓励 2012-01-06 22:23:26
常用的方法是用溶菌酶水解细胞壁的（适当延长消化时间）,溶菌酶可以专一性地作用于肽聚糖分子的N-乙酰胞壁酸(NAM)与乙酰葡萄糖氨(NAG)之间的β-1,4糖苷链使之断裂，使细菌细胞壁变得松驰。。。如果实在很难破壁的话可以试试先用溶菌酶处理1-2h，再超声破碎细胞提取蛋白。
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7楼2012-01-06 13:08:00
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