应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 重叠PCR问题
51/1返回列表
查看: 746  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

cecilia533

新虫 (小有名气)

[交流] 重叠PCR问题

我用重叠PCR的方法做定点突变 融合了两个基因  长度分别为150 左右和 1500左右  可测序回来以后长的那个基因多了 36个bp  其它位置完全正确  多的又不是两个基因重叠的部分 是短基因的大概引物前面几个活几十个bp的位置。 求大家 帮帮我
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-12-29 14:12:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cecilia533

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by rhguo at 2012-02-20 16:44:37
请教下楼主，150bp的dna好不好回收啊？

回收应该也是可以的，但我就不做胶回收了，就只做纯化
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-28 20:14:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

小小的天下

铁虫 (初入文坛)
★
cecilia533(金币+1):谢谢参与
这个问题我也碰到过，可能是模板与引物匹配上的问题，我是重新设计了引物做的，我觉得可以把复性的温度提高试试看
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-01-11 11:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rhguo

铜虫 (小有名气)
★
cecilia533(金币+1):谢谢参与
请教下楼主，150bp的dna好不好回收啊？
赞一下 回复此楼
3楼2012-02-20 16:44:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imyting

至尊木虫 (正式写手)
★
cecilia533(金币+1):谢谢参与
应该是引物的问题，不过该提高的应该是退火温度，150bp想胶回收可能不太好，回收率太低。
赞一下 回复此楼
4楼2012-02-20 18:03:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭