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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lywac

铜虫 (小有名气)

[求助] western blot中蛋白质转印问题

请教各位虫友,在western blotting中蛋白转印后,mark不清楚,是什么原因?另外,请教各位,你们做的时候,电流、电压分别多大?给个参考,先行谢过啦
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等你,是我一生的承诺
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lywac

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by neon_alone at 2011-12-29 14:15:28:
marker不清楚,你确定在转膜缓冲液加甲醇了吗?膜之前也要拿甲醇活化5-10秒钟

这些都做过了
等你,是我一生的承诺
5楼2011-12-29 22:21:09
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查看全部 18 个回答

neon_alone

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): good 2011-12-29 17:44:08
marker不清楚,你确定在转膜缓冲液加甲醇了吗?膜之前也要拿甲醇活化5-10秒钟
2楼2011-12-29 14:15:28
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 鼓励应助! 2011-12-30 09:24:14
在转膜过程中,110mA恒流,90min,是不是转膜时间不够啊?一般来说小分子蛋白20kd一下转膜45min就可以,分子量大一些的90min就可以了。另外,转膜时,胶和膜贴在一起后尽量别在移动,不然条带不清楚,影响结果。
聪明才智要为意外做准备~~
3楼2011-12-29 15:13:18
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ljw796

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+1): 鼓励交流! 2011-12-30 09:24:21
能否说下你的实验步骤,以便于大家分析?
4楼2011-12-29 16:13:39
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