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sean-u

金虫 (小有名气)

[求助] CTAB提DNA方法中的困惑

本人用的CTAB法提的水稻DNA,用的是氯仿/异戊醇为24:1,结果测浓度A260/280大于2.0,大概2.090这个样子,浓度还好。请问有什么方法能让值稳定在1.8---2.0之间,谢谢大家。
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人生就是不停的战斗!
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): Good! 2011-12-21 19:04:33
CTAB提要比SDS提要好一些!
如果楼主觉得不行,可以用24:1多抽提几次!
真相是最大的奢侈品
2楼2011-12-21 16:34:02
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sean-u

金虫 (小有名气)

引用回帖:
楼: Originally posted by wanhscn at 2011-12-21 16:34:02:
CTAB提要比SDS提要好一些!
如果楼主觉得不行,可以用24:1多抽提几次!

我提了两次,不知道够不够?
人生就是不停的战斗!
3楼2011-12-21 16:57:32
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个OD值没有问题的啊 完全可以进行下步实验
4楼2011-12-21 16:57:58
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sean-u

金虫 (小有名气)

引用回帖:
楼: Originally posted by shuangzi8761 at 2011-12-21 16:57:58:
你这个OD值没有问题的啊 完全可以进行下步实验

我是要那去测序用,合同上写着要1.8--2.0之间,木办法啊
人生就是不停的战斗!
5楼2011-12-21 16:59:06
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匿名

用户注销 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
6楼2011-12-22 08:42:46
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longrna

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shuangzi8761 at 2011-12-21 16:57:58:
你这个OD值没有问题的啊 完全可以进行下步实验

2.0其实真的没问题.。。。。
一般来说有RNA污染或条带有比较严重的smear 260/280即有可能>2.0,你可以电泳看一看所提DNA有没问题。
伟大航线....
7楼2011-12-22 09:52:37
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lingbingzeng

金虫 (小有名气)

有机溶剂抽提都过夜轻轻振荡,充分混匀,应该会好很多。
8楼2011-12-22 11:28:24
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steler_ly

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
RNA污染,用RNase消化消化就可以了……
9楼2011-12-22 14:37:36
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sean-u

金虫 (小有名气)

引用回帖:
楼: Originally posted by lingbingzeng at 2011-12-22 11:28:24:
有机溶剂抽提都过夜轻轻振荡,充分混匀,应该会好很多。

今天提的还好,有两个是2.0以上,明天试试你这种方法,谢谢
人生就是不停的战斗!
10楼2011-12-22 21:24:46
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