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langshi1712

木虫 (正式写手)

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[求助] 凋亡western做caspase的疑惑已有2人参与

做western，凋亡相关的，有几个简单的问题求教一下大家，caspase3 怎么还会有cleaved的呢，呈现两条带，这是为什么呢，代表什么意思呢，数据如何分析啊，还有啊，一般做caspase3的。文献里面的caspase有好几种表达方法，caspase， procaspase，cleaved caspase，各代表什么意思啊，区别在哪里。问题十分幼稚，让大伙见笑了

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1楼 2011-12-19 23:14:12

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needle_ld

至尊木虫 (正式写手)

木虫学者

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【答案】应助回帖

the antibody from Millipore is not as good as from Cell signaling.
Millipore antibody usually stored in fridge but not freezer; it can be repeatedly used for very limited times.
What is your sample loading (total protein), better over 50ug, otherwise you will not get good band no matter how much antibody you are using.
how do you prepare the sample? the RIPA for lysate is very important, especially if you are talking about phospho-peptide.
this is especially for the 4th floor