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5xiaosh

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取,超螺旋前面还有一条带,怎么回事?

各位大侠,我做过很多次质粒提取,有很多都出现超螺旋前面还有一条带的情况。我用的QIAGEN的试剂盒。是菌有问题吗?第二幅图的6、7、8孔是我自己用转化的菌,提得质粒,就没出现这种情况。有大侠遇到我这种情况的吗?

超螺旋前得杂带



超螺旋前得杂带

[ Last edited by silicare on 2014-2-17 at 12:01 ]
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5xiaosh

银虫 (小有名气)

引用回帖:
楼: Originally posted by 天使托 at 2011-12-18 19:59:16:
单酶切或者双酶切直接验证就可以了。。。

如果单酶切跑电泳 只有一条带  是不是说 前面那条咋带 是变性的超螺旋 ?
9楼2011-12-19 09:04:24
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查看全部 19 个回答

5xiaosh

银虫 (小有名气)

是自己讲得不清楚吗 怎么没人回复
2楼2011-12-17 12:53:28
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panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是原始菌种有一个较小的质粒污染,你重新转化后不是好了吗?,但我看还是都有那条小带。最好再做个酶切鉴定,确认是你的质粒
3楼2011-12-17 15:59:15
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5xiaosh

银虫 (小有名气)

引用回帖:
楼: Originally posted by panda73 at 2011-12-17 15:59:15:
可能是原始菌种有一个较小的质粒污染,你重新转化后不是好了吗?,但我看还是都有那条小带。最好再做个酶切鉴定,确认是你的质粒

谢谢您。我说的是3kb处的那条杂带,就是最下面的那条咋带。我们实验室我还没见过有这么小的质粒呀。我用的是别人的菌,她们已经提过质粒,没有这种情况且送去测序,是正确的。难道我拿过来用的时候,被我污染了?另外,有一次我们实验室的跟我一块提质粒,她出现这种情况了,我却提的挺好。
4楼2011-12-17 17:18:46
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