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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 关于DNA测序末端终止法的一点问题？
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shangjie111

木虫 (正式写手)

灯泡

[求助] 关于DNA测序末端终止法的一点问题？

末端终止法，既然是用4种荧光标记的ddNTP去终结DNA的延长，那么，我想能不能把dNTP标记上4种颜色的荧光，在DNA延长的时候加入，最后观察荧光，记录不同的颜色信息，然后我们就知道未知DNA的序列。这样岂不简单一点，不知道为什么不行？希望虫友能够回答我的问题。

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少壮不努力，老大读生技
1楼 2011-12-13 21:20:01
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3): Good! 2011-12-14 11:05:15
引用回帖:
7楼: Originally posted by shangjie111 at 2011-12-13 23:04:30:
末端测序我懂的，就是不知道我的想法为什么不对呢，难道dNTP不能标记荧光？

感觉你还是没大弄懂末端测序啊。

dNTP也能标记荧光，但是标记了有什么用？
只有ddNTP才能使扩增终止，只有标记终止处得ddNTP才能读出该碱基的位置嘛，你说将扩增产物中间的dNTP标记了，通过荧光能读出啥数据？
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Thank-you，so-blue.
8楼2011-12-14 09:05:34
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shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
目前测序好像是这种方法？
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2楼2011-12-13 21:36:22
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shangjie111

木虫 (正式写手)

灯泡
引用回帖:
楼: Originally posted by shaquila at 2011-12-13 21:36:22:
目前测序好像是这种方法？

现在的短的序列测序是用末端终止法，但是用的是荧光标记的ddNTP,我现在比较疑惑的是为什么不能荧光标记的dNTP呢。ddNTP与dNTP相差一个氧
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少壮不努力，老大读生技
3楼2011-12-13 21:55:46
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panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你再好好读一读末端终止法测序的原理和实际操作。
赞一下 回复此楼
4楼2011-12-13 22:25:33
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