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汕头大学海洋科学接受调剂
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纯渴

金虫 (正式写手)


[交流] 为什么我作ELISA,结果是为负数

我做肝细胞上清作ELISA,标准曲线做了,带到自己的实验组里去,发现结果都为负数,查文献看人家的图怎么样也有十几的,不知道是什么原因,哪位大侠可以帮忙下,结果附下图
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  • 附件 1 : 组件组.xls
  • 2011-12-11 21:29:00, 19.5 K

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dy_414

木虫 (正式写手)



纯渴(金币+1):谢谢参与
纯渴(金币+3): 2011-12-13 19:07:25
第一可能是波长不对,可能是酶标仪上显示的波长和实际的滤光片不对应,换句话说就是比如选的是450nm的波长,但是实际在450的位置装的是655nm的滤光片。

第二可能是溶液里有沉淀

第三可能是板子脏了,如果有能冲洗的洗板机可以冲洗bottom,或者洗瓶冲干净用滤纸吸干,然后双波长检测
4楼2011-12-12 14:20:56
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纯渴

金虫 (正式写手)


附表没写清楚,做了说明的在Word里

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  • 2011-12-11 21:34:50, 85 K
2楼2011-12-11 21:35:33
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liuyuncun

金虫 (小有名气)



纯渴(金币+1):谢谢参与
纯渴(金币+2): 2011-12-13 19:07:34
我看了一下你做的图,感觉有点别扭呢,一般都是OD值当纵坐标,浓度当横坐标的。浓度和OD值负相关,你的结果是负数,按照标准曲线应该是OD值太高了,含量是零啊,你觉得呢?
3楼2011-12-12 08:32:25
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纯渴

金虫 (正式写手)


引用回帖:
: Originally posted by dy_414 at 2011-12-12 14:20:56:
第一可能是波长不对,可能是酶标仪上显示的波长和实际的滤光片不对应,换句话说就是比如选的是450nm的波长,但是实际在450的位置装的是655nm的滤光片。

第二可能是溶液里有沉淀

第三可能是板子脏了,如果有 ...

谢谢,我用的是现买的ELISA板,,第三个原因可以去除,现在在考虑是不是细胞密度太少了,导致浓度过低,不在检测范围之内,所以导致了负值,还望大家给予解答
5楼2011-12-13 19:07:13
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