应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 测序结果发现，在引物位置多了一位碱基，是什么原因引起的？
51/1返回列表
查看: 3883  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

nestzhao

木虫 (小有名气)

[求助] 测序结果发现，在引物位置多了一位碱基，是什么原因引起的？

今天收到测序结果，发现在我的目标片段的引物的位置，多了一位碱基。不知道是什么原因引起的？？是测序引起的问题，还是引物本身就有问题？？遇到这种情况该怎么处理呢？请各位指教啊！

测序是克隆后去测序的，直接送的是菌液，测序引物用的是通用引物
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
给力2011
1楼 2011-12-11 21:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

中国药人

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
nestzhao(金币+1): 2011-12-12 22:41:57
前几天我的克隆也送测序了，挑了四个克隆，有一个在引物处的酶切位点少了一个碱基，其他的测序都正常，这个与taq酶的质量有很大的关系。
赞一下 回复此楼
有容德乃大，无求品自高。
8楼2011-12-12 19:05:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

匿名

用户注销 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
nestzhao(金币+1): 2011-12-11 22:26:02
本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2011-12-11 22:21:57
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

nestzhao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by mengfei8336 at 2011-12-11 22:21:57:
不明白你的具体意思，如果多出来的碱基是在目的基因外的，那就无妨。你的目的基因多大？有时DNA过长的话在两端会出现一些错误，是正常的。

我这个多出来的碱基是在片段内的，我觉得这个片段大小应该不是问题，我测序是测了多个反应的，然后再拼接的。这个多出来的碱基位于下游引物的位置的中间。测序是双向测通的。
赞一下 回复此楼
给力2011
3楼2011-12-11 22:25:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
nestzhao(金币+3): 2011-12-11 23:12:40
西瓜: 回帖置顶 2011-12-12 17:24:16
西瓜(金币+2): Good！除去引物的问题，PCR本身也有一定的概率会出错，所以克隆时尽量用高保真酶。一般就如panda73所言，多挑几个克隆去测序就好。 2011-12-12 17:29:35
利用PCR进行基因扩增和克隆时，经常出现在引物区的突变，原因主要是引物合成质量不高（缺失或插入），多挑几个阳性克隆进行测序，就好了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-12-11 22:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 有人投过CCC中国控制会议吗？ 19+3 初九凡 2026-04-26 4/200 2026-05-02 21:11 by Equinoxhua
[考博] 考博 +4 Eternitf 2026-04-29 4/200 2026-05-02 16:10 by yejenny
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 16:06 by zahslv263y
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:51 by zahslv263y
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:51 by zahslv263y
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:36 by zahslv263y
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:21 by zahslv263y
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:06 by zahslv263y
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-02 14:21 by zahslv263y
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-02 14:06 by zahslv263y
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-02 14:06 by zahslv263y
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 3/150 2026-05-02 10:21 by ovidyohpyz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-02 10:21 by ovidyohpyz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 3/150 2026-05-02 09:36 by dz7y1p1i98
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 5/250 2026-05-02 09:21 by dz7y1p1i98
[考博] 药化及相关博士的申请 5+3 中药学渣 2026-04-29 3/150 2026-05-01 18:14 by babero
[论文投稿] 一篇MDPI论文改变了学习工作和生活 +3 helsinglee 2026-04-29 4/200 2026-05-01 11:45 by bobvan
[文学芳草园] 太白金星有点烦 +3 yexuqing 2026-04-27 3/150 2026-04-30 21:56 by myrtle
[考博] 中国地质大学（北京）博士招生补录，数理学院材料科学与工程专业和材料与化工专业 +3 liuxh329 2026-04-29 3/150 2026-04-30 15:42 by 顺利毕业zs
[基金申请] 收到国自然专家邀请后几年才会有本子送过来评 +3 barley5 2026-04-30 3/150 2026-04-30 14:58 by aspect3000
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭