| 查看: 5332 | 回复: 13 | ||||||||
| 本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||||||
木左左银虫 (正式写手)
|
[求助]
高GC含量基因片段PCR问题
|
|||||||
|
大家好，我现在克隆一组目的片段，以cDNA为模板，片段大小2kbp左右，GC含量均超过60%，实验做了2个多月，没有进展，很是苦恼 主要用的大连宝生物的la酶和GCbuffer 我在网上搜过，高GC含量片段国内肯定很多学校有成熟的方法，国外更多的是专利，我希望大家能帮帮我，他别是一下问题： 1.关于引物设计的问题，需要特别注意什么？ 2.反应体系的问题，个组分的量，哪种酶效果好，额外的试剂？ 3.程序问题，Tm值较高，是不是退火温度也可以比较高？变形温度用不用很高？ 4.比较高的GC含量到底对基因的结构有什么影响？ 如果哪位师兄师姐有这方面的经验或者是专利方面的信息业希望可以告诉我，小弟不胜感激，谢谢大家！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 PCR技术 | 生物信息学软件应用 | 【分子生物】EPI帖 | 有助于于我的SNP |
| 生物资源 | 基因工程和分子生物学 |
» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有56人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
大片段PCR扩增求助
已经有34人回复- 关于GC含量高的模板
已经有12人回复
- 求助！大片段4kb左右基因PCR克隆方法
已经有15人回复
- 基因组中长片段PCR应该注意的几个问题
已经有14人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- pcr，RACE,低表达量基因的克隆
已经有8人回复
- PCR 扩全长
已经有20人回复
- 【求助/交流】菌落PCR求助
已经有23人回复
- 【求助/交流】基因组PCR老P不出目的带
已经有39人回复
12楼2011-12-13 16:51:27