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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western-blotting 为什么老是不能显色？
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hwandy87

银虫 (小有名气)

[交流] western-blotting 为什么老是不能显色？

蛋白质重组表达时，跑SDS-PAGE感觉有目的条带，但做Western-blotting时却没有条带，有时候能隐约的看到一些很不清晰的带...是怎么回事啊？

PS：W-B时，预染Maker会出现跑花，是怎么回事啊？
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1楼 2011-12-08 12:59:31
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chongjian

木虫 (正式写手)
★
hwandy87(金币+1):谢谢参与
你可以把胶先做一个银染，看有没有你的目的带，然后再重做一次western，预染Marker跑花原因：1是你点样跑胶引起，不要点样太靠边，2是转膜引起
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14楼2012-01-07 09:47:11
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
★
hwandy87(金币+1):谢谢参与
是抗体的问题还是ecl的问题啊     你们的抗体是哪家的啊    怎么实用的 呢
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5楼2011-12-08 16:56:51
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maothree54

至尊木虫 (知名作家)
★
hwandy87(金币+1):谢谢参与
有可能是你转膜的时候出现差错，没有转上去；
还有可能是你的发光底物有问题：太灵敏，很容易淬灭！
总之，原因是很多的，楼主要重复实验，试着去逐个排除上述可能的原因！
祝你顺利！
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8楼2011-12-09 11:31:23
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yayashuai

木虫 (正式写手)
★
hwandy87(金币+1):谢谢参与
小朋友，，，你做实验不认真了吧...
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9楼2011-12-09 12:31:04
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hwandy872楼
2011-12-08 14:29   回复  
linyingjia:编辑内容 2011-12-08 16:55
[ Last edited by linyingjia on 2011-12-8 at 16:55 ]
hwandy873楼
2011-12-08 14:29   回复  
linyingjia:编辑内容 2011-12-08 16:55
[ Last edited by linyingjia on 2011-12-8 at 16:55 ]
hwandy874楼
2011-12-08 14:29   回复  
linyingjia:编辑内容 2011-12-08 16:56
[ Last edited by linyingjia on 2011-12-8 at 16:56 ]
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