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别来无恙

木虫 (正式写手)

[求助] 色谱柱死时间怎么算

安捷伦
快速分离高通量柱，
600 bar
Eclipse Plus C18
4.6 x 50 mm, 1.8 μm
流速0.3ml/min
死时间是多少
理论死时间怎么算？？
千万不要是1.7min啊！！！！

[ Last edited by 别来无恙 on 2011-12-5 at 17:13 ]
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1楼 2011-12-05 17:05:35
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别来无恙

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhaolianhai at 2011-12-06 18:14:22:
在你样品里面加个尿嘧啶的标准品试试，看看他们的出峰时间差多少，如果是一样的或是2个峰分不开，那楼主你悲剧了，就是没保留了，如果是有差别的，而且分离度还可以，那就是有保留了，是哪个老师算错了。

实验室没有尿嘧啶啊！我翻出了柱子的盒子里的datasheet，上面在2ml/min流速下，尿嘧啶2.01min出峰，我是不是可以大胆推测在0.3的流速下是1.34min呢？
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6楼2011-12-06 19:09:25
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weijie302

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西湖醉鱼(金币+1): 欢迎常来 2011-12-05 23:46:40
别来无恙(金币+10): 谢谢了，我明白了。 2011-12-06 10:30:15
死时间不是算的，是测出来的。注意到你说的是C18柱，这样你可以用尿嘧啶作为测试样品，进样一针，尿嘧啶在C18柱上没保留，它的出峰时间就是死时间。
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2楼2011-12-05 18:04:41
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别来无恙

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by weijie302 at 2011-12-05 18:04:41:
死时间不是算的，是测出来的。注意到你说的是C18柱，这样你可以用尿嘧啶作为测试样品，进样一针，尿嘧啶在C18柱上没保留，它的出峰时间就是死时间。

我想问的是理论上的保留时间，因为有个审稿人说根据流速我的那个柱子理论上的死时间是1.7分钟，但我的峰在1.71min就出来了，按说不能毫无保留啊。请高手赐教
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3楼2011-12-05 19:30:43
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狒狒童鞋

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-12-06 20:49:09
那你就只能算算色谱柱的体积和连接管的体积，除以流速。
我最近也在想办法测死时间，看到有些文献上说了这么一句话：The base-
line perturbation resulting from injection of the mobile phase was
used as void volume marker (t0).
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我打球你介意吗？
4楼2011-12-06 10:33:20
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