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cindybrella

铁杆木虫 (知名作家)

魔女

[求助] 关于真核载体的表达问题

据说要做这方面的实验,但是对于载体的构建和表达一点头绪都没有~~真核表达载体的选择,以及加启动子,信号肽等~~~不知道去哪里找相关的文献和技术路线。由于我们实验室不是做分子的,所以对这方面没有一点经验,特来贵版块请求高手们帮帮忙~~定重谢!!!如果有好的建议和方法会追加币币!谢谢~~
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请给我勇气和力量,让我自由的翱翔~~
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

qiujun8982

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, MolEPI+1): 鼓励发帖交流。 2011-12-01 19:37:16
cindybrella(金币+5): 感谢您的应助,辛苦啦~~\(^o^)/~这个非常的好!再次感谢!祝您周末愉快~~\(^o^)/~ 2011-12-02 20:52:31
普通的表达载体有:
pCDNA3.1 (non fusion or fusion) 
pCI­HA  (fusion with HA tag) 
pRK5­FLAG (fusion with FLAG tag) 
pFLAG­CMV (fusion with FLAG tag) 
pEGFP­C1/N1 
pIRES2 ­EGFP
可根据自己的需要来选择不同的载体,选定好具体的一个载体可以在网上详细了解一下载体的用途。以下网站为载体构建详细的过程与方法,强烈建议参考一下:http://wenku.baidu.com/view/967d ... eight=8&count=5(不用金币哦)
7楼2011-12-01 16:22:01
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普通回帖

寒雨人生

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

锅对生物曾经很感兴趣,现在不懂
哈哈
飘过了……
2楼2011-12-01 10:16:28
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寒雨人生

铁杆木虫 (知名作家)

哎呀,不好意思搞错了,没注意选项
过不是来应助滴……
对不起
3楼2011-12-01 10:17:43
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liaotiantian

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

cindybrella(金币+3): 可惜没有这个书~~我得赶紧去找找看~~ 2011-12-02 20:53:17
建议参考朱旭芬编著的《基因工程实验指导》,里面实验原理方法步骤,注意事项都很不错。俺从本科一直参考到现在。
4楼2011-12-01 10:28:54
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cindybrella

铁杆木虫 (知名作家)

魔女

引用回帖:
3楼: Originally posted by 寒雨人生 at 2011-12-01 10:17:43:
哎呀,不好意思搞错了,没注意选项
过不是来应助滴……
对不起

没关系啦师叔~~哈哈~~不要动不动就说“对不起”,弄的俺也很不好意思,没有name严重啦~~还要感谢师叔帮忙顶贴捏~~
请给我勇气和力量,让我自由的翱翔~~
5楼2011-12-01 11:18:09
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jiangyhai

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

cindybrella(金币+1): 感谢您的帮助~~~辛苦啦~~学习啦~~~\(^o^)/~以后多多指教~~ 2011-12-02 20:53:58
有商业化的真核表达载体如pCDNA3.1,只要你把目的基因通过MCS引入即可。
静心做事。
6楼2011-12-01 15:42:48
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cindybrella

铁杆木虫 (知名作家)

魔女

自己顶顶贴,希望大家来交流提供帮助~~~
请给我勇气和力量,让我自由的翱翔~~
8楼2012-01-05 22:00:54
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yw_1009

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jiangyhai at 2011-12-01 15:42:48:
有商业化的真核表达载体如pCDNA3.1,只要你把目的基因通过MCS引入即可。

问下
MCS 是什么意思
我们这买了pCDNA3.1
想要表达抗体
怎么个步骤啊
希望高手能详细解答下
谢谢了!
9楼2012-01-09 04:11:22
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小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by yw_1009 at 2012-01-09 04:11:22:
问下
MCS 是什么意思
我们这买了pCDNA3.1
想要表达抗体
怎么个步骤啊
希望高手能详细解答下
谢谢了!

MCS是多克隆位点
快去买一本分子生物学实验指导,上面有详细介绍
10楼2012-01-09 09:06:52
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