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zhang5363

木虫 (小有名气)

[求助] 测定总黄酮含量(三氯化铝法)的显色方法的确定

大家好,最近在做总黄酮的含量测定,考虑到硝酸铝法的测定值偏高,所以用三氯化铝法,文献上用此方法的显色方法不统一:1、有的只用Alcl3;2、有的还用了NaAc,前者用2ml,后者用3ml,或者前者用3ml,后者用5ml;3、还有的再加了NaAc-HAc缓冲盐。我发现第2的方法中,Alcl3加入0.5ml,NaAc加3ml的时候,吸光度比加入0.2、1ml的都大(正如文献“三氯化铝比色法测定中药中总黄酮含量的方法改进”上所说的一样),为什么?第3法中,NaAc-HAc缓冲盐PH<7,我知道有有阻碍溶液pH变化的作用,那酸性环境是为了让酸性的黄酮溶解出来,以利于测定吗?我想问下用哪种方法好,为什么?怎么评定那种好
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卢比奥

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
选哪种显色方法与你的总黄酮的主要成分有关吧,黄酮化合物若分子中主要具有3-羟基、4-羰基或5-羟基、4-羰基或邻二酚羟基,则用三氯化铝较好。
8楼2012-02-29 21:11:34
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独叶一支枪

木虫 (著名写手)

Me用的是Ch.P2010介绍的方法。
2楼2011-11-30 10:40:37
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zhang5363

木虫 (小有名气)

硝酸铝法存在很多问题,我的样品里有咖啡酸,所以,就没用硝酸铝法。
3楼2011-11-30 12:59:54
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平常心11

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


novus(金币+1): 多些交流! 2011-11-30 17:37:31
zhang5363(金币+2): 2011-12-01 19:25:10
本方法属于比色测定,试剂用量应该是过量的才能反映完全或者彻底。试剂多了底色或者是背景色会不同,可能会有吸收干扰,所以你应该用试剂空白校正,就是除被测成分以外的溶液做空白进行校正,才能排除干扰的吧。
4楼2011-11-30 15:49:21
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