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zhang5363

木虫 (小有名气)

[求助] 测定总黄酮含量(三氯化铝法)的显色方法的确定

大家好,最近在做总黄酮的含量测定,考虑到硝酸铝法的测定值偏高,所以用三氯化铝法,文献上用此方法的显色方法不统一:1、有的只用Alcl3;2、有的还用了NaAc,前者用2ml,后者用3ml,或者前者用3ml,后者用5ml;3、还有的再加了NaAc-HAc缓冲盐。我发现第2的方法中,Alcl3加入0.5ml,NaAc加3ml的时候,吸光度比加入0.2、1ml的都大(正如文献“三氯化铝比色法测定中药中总黄酮含量的方法改进”上所说的一样),为什么?第3法中,NaAc-HAc缓冲盐PH<7,我知道有有阻碍溶液pH变化的作用,那酸性环境是为了让酸性的黄酮溶解出来,以利于测定吗?我想问下用哪种方法好,为什么?怎么评定那种好
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wyf1230924

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2012-01-10 21:38:00
第二种方法较好,在弱碱性条件下,黄酮不易氧化,成离子形态,易于和铝离子络合,只有络合后才能显色,用紫外测定吸光度,一般以芦丁为对照,标准曲线没问题,我们做过的,你也可以参考一下药典方法及部颁标准
6楼2011-12-13 22:37:58
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查看全部 15 个回答

独叶一支枪

木虫 (著名写手)

Me用的是Ch.P2010介绍的方法。
2楼2011-11-30 10:40:37
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zhang5363

木虫 (小有名气)

硝酸铝法存在很多问题,我的样品里有咖啡酸,所以,就没用硝酸铝法。
3楼2011-11-30 12:59:54
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平常心11

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


novus(金币+1): 多些交流! 2011-11-30 17:37:31
zhang5363(金币+2): 2011-12-01 19:25:10
本方法属于比色测定,试剂用量应该是过量的才能反映完全或者彻底。试剂多了底色或者是背景色会不同,可能会有吸收干扰,所以你应该用试剂空白校正,就是除被测成分以外的溶液做空白进行校正,才能排除干扰的吧。
4楼2011-11-30 15:49:21
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