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zhang5363木虫 (小有名气)
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[求助]
测定总黄酮含量（三氯化铝法）的显色方法的确定
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| 大家好，最近在做总黄酮的含量测定，考虑到硝酸铝法的测定值偏高，所以用三氯化铝法，文献上用此方法的显色方法不统一：1、有的只用Alcl3；2、有的还用了NaAc，前者用2ml，后者用3ml，或者前者用3ml，后者用5ml；3、还有的再加了NaAc-HAc缓冲盐。我发现第2的方法中，Alcl3加入0.5ml，NaAc加3ml的时候，吸光度比加入0.2、1ml的都大（正如文献“三氯化铝比色法测定中药中总黄酮含量的方法改进”上所说的一样），为什么？第3法中，NaAc-HAc缓冲盐PH<7，我知道有有阻碍溶液pH变化的作用，那酸性环境是为了让酸性的黄酮溶解出来，以利于测定吗？我想问下用哪种方法好，为什么？怎么评定那种好 |
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4楼2011-11-30 15:49:21
2楼2011-11-30 10:40:37
zhang5363
木虫 (小有名气)
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3楼2011-11-30 12:59:54
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
karl2100(金币+1): 多谢指教！ 2011-12-05 00:01:40
zhang5363(金币+4): NaAc的加入，使得吸收波长红移，故也作为总黄酮的检测试剂，NaAc/HAc是一组缓冲溶液，控制PH，形成一个稳定的环境 2011-12-08 01:02:11
zhang5363(金币+5): ★★★很有帮助 2012-03-06 10:30:24
karl2100(金币+1): 多谢指教！ 2011-12-05 00:01:40
zhang5363(金币+4): NaAc的加入，使得吸收波长红移，故也作为总黄酮的检测试剂，NaAc/HAc是一组缓冲溶液，控制PH，形成一个稳定的环境 2011-12-08 01:02:11
zhang5363(金币+5): ★★★很有帮助 2012-03-06 10:30:24
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黄酮化合物若分子中具有3-羟基、4-羰基或5-羟基、4-羰基或邻二酚羟基，则可与三氯化铝显色； 而NaAc的加入，能使黄酮化合物上酸性较强的酚羟基解离，而导致紫外吸收波长改变（变长，而变化的范围因具体情况而定）；加入量的改变可能会改变波长的变化情况，而出现你说的加入量的改变而导致吸光度的变化； 而再加一个HAc，可能是你所说的调节PH来让黄酮游离的吧；正好NaAc/HAc组成一组缓冲溶液，好控制PH。 |
5楼2011-12-04 21:28:55
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