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求教多糖、蛋白的HPLC
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zhuruijiemei
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[交流]
求教多糖、蛋白的HPLC
有哪位高手研究过不同分子量的蛋白和多糖在同一根色谱柱上的分离情况吗?
分子量50000左右的蛋白和大约6000左右的糖在同一时间出峰了,怎么回事啊?
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2011-11-28 14:25:59
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zhuruijiemei(金币
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):谢谢参与
等待高手进来解释俺跟着学习一下哦~~~~~~~~~~
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2011-11-28 17:07:43
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蛋白的单独跑过,出峰时间和糖的差不多
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2011-11-28 19:12:47
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zhuruijiemei(金币
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):谢谢参与
tuobaohua(金币+1): 鼓励交流 2011-11-29 07:53:14
请问色谱柱型号和流动相?
蛋白和多糖都应该用凝胶色谱柱做液相色谱分析,且凝胶色谱柱有一定的分子量范围,超出范围的没有分离效果,另外流动相最好是缓冲液
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2011-11-28 21:20:17
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zhuruijiemei(金币
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):谢谢参与
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3楼
:
Originally posted by
zhuruijiemei
at 2011-11-28 19:12:47:
蛋白的单独跑过,出峰时间和糖的差不多
换流动相试试吧
另外,差不多和相同是不一样的哦
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6楼
2011-11-29 07:52:56
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Originally posted by
shisshan1978
at 2011-11-28 21:20:17:
请问色谱柱型号和流动相?
蛋白和多糖都应该用凝胶色谱柱做液相色谱分析,且凝胶色谱柱有一定的分子量范围,超出范围的没有分离效果,另外流动相最好是缓冲液
色谱柱是KS-805, 两种组分肯定在分离范围内,流动相是水,糖的出峰时间是对的,大约11.5min,但蛋白质分子量有5万多,出峰时间应该在糖之前很多啊,为什么也在这个时间出来了呢?
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7楼
2011-11-29 09:01:11
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tuobaohua(金币+2): 鼓励交流! 2011-11-30 07:46:08
分子量50000的蛋白和6000的多糖都在KS-805柱分离范围的下限附近,分离效果不可能很好,建议换用KS_804或803试试,流动相改成缓冲液
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10楼
2011-11-29 20:09:34
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zhuruijiemei
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10楼
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Originally posted by
shisshan1978
at 2011-11-29 20:09:34:
分子量50000的蛋白和6000的多糖都在KS-805柱分离范围的下限附近,分离效果不可能很好,建议换用KS_804或803试试,流动相改成缓冲液
我用G100试了,也没有分开,有没有可能这两类分子在同一柱子上的出峰时间本来就差不多
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11楼
2011-11-29 23:22:59
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lingyin87
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zhuruijiemei(金币+1): 谢谢参与
用的什么柱子,是凝胶柱么
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13楼
2012-04-28 13:23:52
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yingying1588
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2011-11-28 21:27
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clarktao
8楼
2011-11-29 09:25
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ivy明天
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2011-11-29 09:34
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江南的竹
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2011-12-11 01:06
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