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zhuruijiemei

银虫 (小有名气)

[交流] 求教多糖、蛋白的HPLC

有哪位高手研究过不同分子量的蛋白和多糖在同一根色谱柱上的分离情况吗？
分子量50000左右的蛋白和大约6000左右的糖在同一时间出峰了，怎么回事啊？
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1楼 2011-11-28 14:25:59
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userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
zhuruijiemei(金币+1):谢谢参与
等待高手进来解释俺跟着学习一下哦~~~~~~~~~~
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2楼2011-11-28 17:07:43
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zhuruijiemei

银虫 (小有名气)
蛋白的单独跑过，出峰时间和糖的差不多
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3楼2011-11-28 19:12:47
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shisshan1978

木虫 (正式写手)
★ ★
zhuruijiemei(金币+1):谢谢参与
tuobaohua(金币+1): 鼓励交流 2011-11-29 07:53:14
请问色谱柱型号和流动相？
蛋白和多糖都应该用凝胶色谱柱做液相色谱分析，且凝胶色谱柱有一定的分子量范围，超出范围的没有分离效果，另外流动相最好是缓冲液
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4楼2011-11-28 21:20:17
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tuobaohua

荣誉版主 (文坛精英)
★
zhuruijiemei(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhuruijiemei at 2011-11-28 19:12:47:
蛋白的单独跑过，出峰时间和糖的差不多

换流动相试试吧
另外，差不多和相同是不一样的哦
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6楼2011-11-29 07:52:56
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zhuruijiemei

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by shisshan1978 at 2011-11-28 21:20:17:
请问色谱柱型号和流动相？
蛋白和多糖都应该用凝胶色谱柱做液相色谱分析，且凝胶色谱柱有一定的分子量范围，超出范围的没有分离效果，另外流动相最好是缓冲液

色谱柱是KS-805， 两种组分肯定在分离范围内，流动相是水，糖的出峰时间是对的，大约11.5min，但蛋白质分子量有5万多，出峰时间应该在糖之前很多啊,为什么也在这个时间出来了呢？
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7楼2011-11-29 09:01:11
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shisshan1978

木虫 (正式写手)
★ ★
tuobaohua(金币+2): 鼓励交流！ 2011-11-30 07:46:08
分子量50000的蛋白和6000的多糖都在KS-805柱分离范围的下限附近，分离效果不可能很好，建议换用KS_804或803试试，流动相改成缓冲液
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10楼2011-11-29 20:09:34
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zhuruijiemei

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by shisshan1978 at 2011-11-29 20:09:34:
分子量50000的蛋白和6000的多糖都在KS-805柱分离范围的下限附近，分离效果不可能很好，建议换用KS_804或803试试，流动相改成缓冲液

我用G100试了，也没有分开，有没有可能这两类分子在同一柱子上的出峰时间本来就差不多
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11楼2011-11-29 23:22:59
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lingyin87

新虫 (初入文坛)
★
zhuruijiemei(金币+1): 谢谢参与
用的什么柱子，是凝胶柱么
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13楼2012-04-28 13:23:52
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yingying15885楼
2011-11-28 21:27  
zhuruijiemei(金币+1):谢谢参与
祝福！！
clarktao8楼
2011-11-29 09:25  
zhuruijiemei(金币+1):谢谢参与
ivy明天9楼
2011-11-29 09:34  
zhuruijiemei(金币+1):谢谢参与
江南的竹12楼
2011-12-11 01:06  
zhuruijiemei(金币+1):谢谢参与
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