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96孔板做MTT时该显色的不显色,细胞污染?请求支援
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石头影子2002
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[交流]
96孔板做MTT时该显色的不显色,细胞污染?请求支援
初做MTT,做了3次都失败了。真是郁闷,不知道问题到底出在哪里?我最后用排枪加细胞时,是从下往上加的,最后观察细胞时发现从地5排-第8排的细胞本来应该长势良好,结果却死了。怎么回事呢?是不是手臂跨越无菌区,导致细胞染菌?
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2011-11-28 11:37:44
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石头影子2002
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jhu132llh(金币+1): 鼓励积极交流 2011-12-01 17:40:26
引用回帖:
4楼
:
Originally posted by
jhu132llh
at 2011-11-29 15:11:30:
细胞是不是污染是很明显的
应该不是细胞污染的问题
所以。。。。。。
你先做一组
不加药物,其他处理手段一样的的96孔板
看看细胞的生长情况
如果这个组没问题的话
可能是药物处理导致
那就需要重新调整药 ...
细胞是UT7细胞,依赖EPO生长,为了检测血清中是否有EPO中和抗体,我孔板上分了几组,空白,正常,阴性血清,阳性血清,待测血清。本来结果应该是空白细胞死亡,正常组细胞生长,阴性血清组细胞正常,阳性因为有浓度梯度,高浓度的细胞死亡,低浓度的细胞正常。可是我做的结果,正常对照细胞都死了,其它几个血清组96孔板倒数8,7,6,5横排的细胞都死了。不知道我这么说,你是否能听明白?希望你能指点,我郁闷啊,到底怎回事呢
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2011-11-30 09:43:51
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石头影子2002(金币
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):谢谢参与
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个人感觉不应该是这个原因,再找找其他方面原因
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2楼
2011-11-28 13:52:50
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★ ★ ★
石头影子2002(金币
+1
):谢谢参与
jhu132llh(金币+2): good,鼓励积极应助 2011-12-01 17:39:49
首先要确认你的实验用品是否完全灭菌消毒?
细胞瓶内的细胞状态是否正常?
消化时是否时间过长,导致细胞状态不佳或是死亡
铺板前细胞悬液是否吹打均匀?
铺板后是否在显微镜下观察细胞状态和密度?
是否是加入了其他药物导致细胞死亡?
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3楼
2011-11-29 13:55:49
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+1
):谢谢参与
细胞是不是污染是很明显的
应该不是细胞污染的问题
所以。。。。。。
你先做一组
不加药物,其他处理手段一样的的96孔板
看看细胞的生长情况
如果这个组没问题的话
可能是药物处理导致
那就需要重新调整药物的浓度
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4楼
2011-11-29 15:11:30
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