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YJD落叶梧桐

新虫 (小有名气)

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专业: 病毒学

[求助] 蛋白电泳跑的问题

我做了一个病毒的蛋白电泳，每次跑的时间都在4小时以上，而且跑不到头，我发现在开始的2个小时的时候还算正常（一般跑到分离胶的一般），后来就越跑越慢了，请高手指点一下，顺便说一下，我有了以下2种跑的方案：
1.浓缩胶：电压70伏  电流70多  时间30-40分钟分离胶：电压120伏  120多
2..浓缩胶：电压70伏  电流70多时间30-40分钟分离胶：电压100伏电流100左右  电压120伏 120多

我跑完后就用考马斯亮蓝染色液染30分钟，然后脱色几个小时，发现电泳条带不清楚而且条带也少，以下是我的电泳图，多谢高手指点了

[ Last edited by zhang8826857 on 2011-12-3 at 08:57 ]

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附件 1 : 20111125-3(2).bmp

2011-11-25 20:32:58, 769.05 K

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YJD落叶梧桐

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1楼 2011-11-25 20:33:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

chengjg

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

6楼: Originally posted by brightfuture01 at 2011-11-26 11:25:47:
终于打开它了。扫胶扫的太差了，而且你连marker是哪个都不标。我不知道你的病毒在感染细胞之后收集的时候是否纯化了，纯度在镜检的时候是否足够。

我找了篇PLOS pathogen上面的文章，你自己可以将方法对比一下 ...

您好：我想问一下您蛋白质去糖基化用什么方法呀？如何能把蛋白质糖基去掉？能不能把蛋白质上的糖链收集起来呢？