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shuifen1108金虫 (正式写手)
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[求助]
连接转化进大肠杆菌BL21
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| 做完PCR，从T载体提取质粒，酶切连接pet载体，转化BL21，涂AMP板子是能够生长的，但是提取质粒酶切就是鉴定不出来，为什么呢？如果不是转化成功了，在amp平板上应该是不能生长的吧，可能是哪些原因导致的结果，请指教 |
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5楼2011-11-24 00:33:07
2楼2011-11-23 13:18:16
shuifen1108
金虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
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- 虫号: 903554
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- 性别: MM
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
3楼2011-11-23 14:39:17
jingdejun
铁杆木虫 (小有名气)
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- 红花: 2
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- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
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linyingjia(金币+1): 有道理 2011-11-23 19:55:57
shuifen1108(金币+2): 2011-11-24 21:18:01
linyingjia(金币+1): 有道理 2011-11-23 19:55:57
shuifen1108(金币+2): 2011-11-24 21:18:01
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提供一个思考的方向，能在AMP板子上长出来的也不一定是阳性的。 不信的话，你就挑这些菌落液体培养（加AMP抗性），有些菌就不会长。 之所以会在板子上长出来，最大的可能性就是培养时间过长导致的。 做完转化的板子放在4度冰箱，原本的小菌落会变大，原本没有菌落的地方也可能会长出来一些单菌落，就是差不多的原因。 最好的话就是重新做吧。有时候不要问那么多的原因，重做说不定就会一次成功，特别是做分子的。  希望对楼主有所帮助。最后祝实验顺利。  |
4楼2011-11-23 16:39:28