应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求问紫外分光光度法测RNA浓度和纯度
51/1返回列表
查看: 7026  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

humourhy

新虫 (小有名气)

[求助] 求问紫外分光光度法测RNA浓度和纯度

我的研究方向是做生物材料的，之前对生物学了解很少，不过现在的进度需要涉及一点RT-qPCR的实验，希望大家能够解答我的一点困惑

请问提取出来的RNA，用20uL溶解。如果利用紫外分光光度计测量，用常规的比色皿，需要装3ml的溶液，稀释太多倍了，吸光度很低很难检测。后来委托朋友利用Nanodrop2000检测了下，只需要吸1uL，结果不错，A260/A280=1.94。由于今后开展此方面工作不可能总麻烦朋友，而且这个仪器还挺贵的。所以想请问下大家都是怎么做的呀？

后来我自己查了下，貌似有利用微量比色皿在分光光度计上做的。不知如果采用这个方法，那建议测试稀释多少倍数，且对应吸光度在什么范围比较好呢？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-21 22:25:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

humourhy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shuangzi8761 at 2011-11-22 10:21:06:
我和楼主一样 测浓度要麻烦朋友 不过是女朋友 在楼下实验室

哈哈，这多方便啊~顺便还把感情升华了，hoho~
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-11-22 10:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-11-23 20:56:48
我们也是用NanoDrop，这个好用，1ul即可以测的。那种比色杯的方法是旧的，比较老的方法了，麻烦....
如果你朋友不远，你还是麻烦一下他吧。有NanoDrop的话整个测的操作其实很简单，估计不用1分钟测一个，就是点上1ul 样品然后按一下鼠标即有浓度、260/280等数据出来。
赞一下(3人) 回复此楼
伟大航线....
2楼2011-11-21 23:27:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gjs713

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
humourhy(金币+5): 谢谢您的耐心解答 2011-11-22 10:17:47
西瓜(金币+2): Good！ 2011-11-23 20:57:19
这个我们这边测的还挺多的，每次就是洗2 uL样品稀释50倍，总共100 uL加入微量比色皿的底部槽里就行了，测出来的数据还是比较准确的。OD260/OD280值介于1.7-2.0之间表明纯度比较高。
赞一下(1人) 回复此楼
勤奋、执着、专注，则无坚不破。
3楼2011-11-22 09:37:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

humourhy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gjs713 at 2011-11-22 09:37:30:
这个我们这边测的还挺多的，每次就是洗2 uL样品稀释50倍，总共100 uL加入微量比色皿的底部槽里就行了，测出来的数据还是比较准确的。OD260/OD280值介于1.7-2.0之间表明纯度比较高。

您好，请问下你用的微量比色皿是多少体积的呢？
我这里有的700uL的比色皿，貌似装100uL液面不够高~是不是需要更小的比色皿才合适呀？
听我的师姐说，我们实验室的国产光度计的光源狭缝较宽，对更小体积的比色皿貌似有问题，不知您使用的紫外光度计是什么牌子的呀，进口的还是国产的呢？
非常感谢您的解答~
赞一下 回复此楼
4楼2011-11-22 10:14:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上意见出来了 +6 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 10/500 2026-08-29 15:50 by 微不足道士
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 14:24 by jCd0dEvKHShX
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 14:03 by jCd0dEvKHShX
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 14:02 by jCd0dEvKHShX
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 13:41 by jCd0dEvKHShX
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 11:49 by jCd0dEvKHShX
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:40 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-29 10:18 by winsaint
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭