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jemmy505210

银虫 (小有名气)

[求助] 请问如何测定细菌CFU...。

看文献说使得细菌最终浓度为10的六次方CFU/ml...怎么才能确定是这个浓度呢?
我用的是测OD值

谢谢。。请赐教
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学习再学习
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xzhiqiang

禁虫 (正式写手)


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-22 08:45:12
本帖内容被屏蔽

3楼2011-11-22 01:46:22
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张建荣

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励应助 2011-11-22 08:45:05
稀释一定浓度后涂平板,或在血球计数板上直接数就行了,用od值和实际输出来的数建立关系,完了换算就行了
执着
2楼2011-11-22 00:16:21
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wanjiang09

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
zhang8826857(金币+2): 鼓励交流 2011-11-22 08:45:21
将细菌稀释一系列浓度然后涂板,建立OD和细菌个数的关系。
4楼2011-11-22 08:17:56
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waxn1979

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
jemmy505210(金币+1): 谢谢。。 2011-11-22 15:40:52
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-22 15:50:25
我理解楼主是用比浊法计数吧。
    细菌培养物在其生长过程中,由于原生质含量的增加,会引起培养物混浊度的增高。最古老的比浊法是采用MoFarland比浊管。这是用不同浓度的BaCl2与稀H2SO4配制成的10支试管,其中形成的BaSO4有10个梯度,分别代表10个相对的细菌浓度(预先用相应的细菌测定)。某一未知浓度的菌液只要在透射光下用肉眼与某一比浊管进行比较,如果两者透光度相当,即可目测出该菌液的大致浓度。
    如果要作精确测定,则可用分光光度计进行。在可见光的450~650nm波段内均可测定。为了对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪,可采用不必取样的侧壁三角烧瓶来进行。测定时,只要把瓶内的培养液倒入侧臂管中,然后将此管插入特制的光电比色计比色座孔中,即可随时测出生长情况,而不必取用菌液。
  据个人经验,一般情况下,一般细菌(如大肠杆菌等)在肉汤培养基中培养18-24h后其基本浓度在10的8次方CFU/ml。

以上希望对楼主有所帮助。
5楼2011-11-22 09:10:29
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