应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求高手指点：RT-PCR的引物设计
52/1返回列表
查看: 2868  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhywancx

铜虫 (小有名气)

[求助] 求高手指点：RT-PCR的引物设计

本人要做荧光定量PCR，知道了RNA序列，是否可以直接根据RNA设计引物？如果知道DNA序列，该如何设计？
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

mazhaopeng

» 猜你喜欢
1楼 2011-11-20 15:08:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgykdxwuhui

铜虫 (小有名气)
一般设计的时候，可以根据目标基因的cDNA序列设计，一个引物应该在两个外显子上，即跨越内含子，这样可以避免扩增DNA。
赞一下 回复此楼
12楼2011-11-22 16:01:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

zhywancx(金币+2): 谢谢 2011-11-20 20:05:37
楼主设计引物最好跨内含子，片段长度在80-150bp之间，退火温度一致，可以用在线的primer3或5辅助设计
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
2楼2011-11-20 17:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muyanshuang

木虫 (正式写手)
一般是可以根据RNA序列设计，荧光定量引物，在基本的引物设计原则下，要求更严格一些。
不允许有引物二聚体和任何杂带！
赞一下 回复此楼
3楼2011-11-21 10:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhywancx

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by muyanshuang at 2011-11-21 10:19:14:
一般是可以根据RNA序列设计，荧光定量引物，在基本的引物设计原则下，要求更严格一些。
不允许有引物二聚体和任何杂带！

嗯，谢谢，那如果只查到了DNA序列，能根据DNA序列设计RT-PCR的引物吗?
赞一下 回复此楼
4楼2011-11-21 11:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭