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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长

[求助] 提基因组的问题

用酚氯仿法提一个曲霉基因组,最后用TE溶沉淀时感觉很稠,并且有点淡黄,用未稀释的和稀释30倍的分别跑电泳,结果未稀释的是长长的亮带,稀释的有一条带,但是大小比基因组的要小,如图,前孔是未稀释的,后面一个是稀释的。已经提了三次了,都差不多这样,求解释。。。
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by catmihzh at 2011-11-18 21:32:08:
用酚氯仿法提一个曲霉基因组,最后用TE溶沉淀时感觉很稠,并且有点淡黄,用未稀释的和稀释30倍的分别跑电泳,结果未稀释的是长长的亮带,稀释的有一条带,但是大小比基因组的要小,如图,前孔是未稀释的,后面一个 ...

提纯培养的 都这样了 这个真~~~
可能原因
1  氯仿抽提的时候 取上清注意不要取到中间那层蛋白质,如果上清有粘糊糊的东西,建议去完上清之后,再抽提一次,另外就是要减少菌体加入量。
2   上面也有人说 了 是RNA 污染 你不用管你师姐用没有RNA酶  提完之后,加一点RNA 酶进去 效果会好一点
3  其实吧 有人说要一直冰浴  这个不是完全有必要,有条件的话 就用冷冻离心机  没条件 用常温的 也没什么关系 毕竟你提的是DNA  不是 RNA ,  另外  如果 后续步骤就是做个PCR  其实也没什么  稀释10倍  50倍 照样能扩出来了
12楼2011-11-20 11:20:07
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healerly

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

2楼2011-11-18 23:26:32
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catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长

引用回帖:
2楼: Originally posted by healerly at 2011-11-18 23:26:32:
降解了~~~而且很严重~~~你是怎么裂解菌的?

我用石英砂加DNA提取液研磨的
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3楼2011-11-19 09:44:50
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healerly

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2011-11-19 11:37:56
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