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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 含信号肽的序列能否在原核表达系统PET-32a中表达
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龙开聪

金虫 (小有名气)

贵是一种态度

[求助] 含信号肽的序列能否在原核表达系统PET-32a中表达

我的目的基因序列含有一段信号肽以及终止子，我设计引物的时候全部加上去的，准备用于原核表达，后来听说含信号肽在原核系统中不能表达，不敢确认，特来求助各位高人、前辈，我用于表达的基因加不加信号肽和终止子，以及它们的作用分别是什么啊？是不是加了终止子就不利于我蛋白的纯化啊？望高人解惑！！谢谢，谢谢
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挺住
1楼2011-11-17 09:37:50
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iamboy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

龙开聪(金币+3): 谢谢好心人，那终止子呢？ 2011-11-17 14:36:47
引用回帖:
1楼: Originally posted by 龙开聪 at 2011-11-17 09:37:50:
我的目的基因序列含有一段信号肽以及终止子，我设计引物的时候全部加上去的，准备用于原核表达，后来听说含信号肽在原核系统中不能表达，不敢确认，特来求助各位高人、前辈，我用于表达的基因加不加信号肽和终止子 ...

信号肽是一段疏水性很强的氨基酸，一般用大肠杆菌表达含有信号肽的蛋白都是困难的，建议你重新pcr 构建，去掉信号肽，即使你也能表达出来，90%是包涵体。
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2楼2011-11-17 13:32:34
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