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newbist

铜虫 (小有名气)

[求助] 过硅胶柱时流动相出错了

过硅胶柱时,刚开始用的氯仿:甲醇(20:1),然后第2个流分的时候用的流动相没有摇匀,所以很可能甲醇的比例很大,然后洗出来的东西颜色明显比别的都要深,应该如何处理啊?不想把这个流分放弃。。。。。高人支招啊!
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妖精的手指

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
padodo(金币+3): 感谢应助!学习了! 2011-11-25 23:24:11
呵呵,也许会好一点,不过你用氯仿甲醇过的柱子的话,说明你这流份极性本身就有点大了,极性大的化合物点板出现条带也算正常,比如多酚类的化合物之类的~出现条带主要的原因可能有,第一,还是纯化的不好,杂质较多,互相干扰,影响成点性,此时可以挑成点性好的流份继续纯化几步看看;第二,化合物在该体系中溶解度不好,跑板呈现条带,此时考虑更换展开剂体系;第三,化合物极性较大,成点性不好,此时考虑加酸加碱,改变展开剂极性,改善成点性~暂时我就想到这么多了~
人生目标:农夫,山泉,有点田!
12楼2011-11-24 09:20:30
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普通回帖

妖精的手指

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

newbist(金币+2): 2011-11-16 09:57:44
个人认为,本身已经是第二个流份了,颜色加深是很正常的,也不一定就是没有摇匀,如果真的是没有摇匀的话,一共加了多少流动相,能跑几个保留体积呢,大概算一下,这几个流份合并的时候留神点就行了~别的也没什么好办法了吧,都已经上了柱子了~下次配氯甲,先加甲醇,再加氯仿,稍微摇一摇基本就能匀了~
人生目标:农夫,山泉,有点田!
2楼2011-11-16 08:49:23
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newbist

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 妖精的手指 at 2011-11-16 08:49:23:
个人认为,本身已经是第二个流份了,颜色加深是很正常的,也不一定就是没有摇匀,如果真的是没有摇匀的话,一共加了多少流动相,能跑几个保留体积呢,大概算一下,这几个流份合并的时候留神点就行了~别的也没什么 ...

哦,谢谢啦
3楼2011-11-16 09:57:33
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newbist

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 妖精的手指 at 2011-11-16 08:49:23:
个人认为,本身已经是第二个流份了,颜色加深是很正常的,也不一定就是没有摇匀,如果真的是没有摇匀的话,一共加了多少流动相,能跑几个保留体积呢,大概算一下,这几个流份合并的时候留神点就行了~别的也没什么 ...

麻烦问下,洗脱的时候到最后有必要将柱子彻底洗白么?
4楼2011-11-16 10:04:55
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妖精的手指

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
padodo(金币+5): 很详细的应助!谢谢! 2011-11-25 23:16:05
呵呵,我觉得没有必要,过硅胶柱,肯定会有死吸附的,而且最后极性非常大才能冲下来的东西,一般也不会去分离了~
人生目标:农夫,山泉,有点田!
5楼2011-11-16 11:05:30
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newbist

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 妖精的手指 at 2011-11-16 11:05:30:
呵呵,我觉得没有必要,过硅胶柱,肯定会有死吸附的,而且最后极性非常大才能冲下来的东西,一般也不会去分离了~

哦,谢谢指点,另外 还想问下我收集的流分浓缩之后又沉淀析出,点板时还要在加溶剂将沉淀溶解了再点吗? 还是直接点就可以?
6楼2011-11-16 13:43:44
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妖精的手指

木虫 (小有名气)


408851978(金币+1): 很专业啊 2011-11-27 09:10:02
呵呵,如果是结晶,那就小心的用不溶的溶剂慢慢洗出,单独点板,有可能是纯品呢;如果是粉状之类的,量大的话,可以尝试抽滤,拿不溶溶剂慢慢淋洗,然后不溶物点板;如果是絮状的话,那没啥必要溶了再点板了,不过流份浓缩后肯定挺浓的,注意点板时的浓度就好啦~
人生目标:农夫,山泉,有点田!
7楼2011-11-17 08:58:44
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newbist

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 妖精的手指 at 2011-11-17 08:58:44:
呵呵,如果是结晶,那就小心的用不溶的溶剂慢慢洗出,单独点板,有可能是纯品呢;如果是粉状之类的,量大的话,可以尝试抽滤,拿不溶溶剂慢慢淋洗,然后不溶物点板;如果是絮状的话,那没啥必要溶了再点板了,不过 ...

前面两个结晶和粉末用不溶溶剂淋洗下来,要再用可溶的溶剂溶解了再点板么?
8楼2011-11-18 09:27:48
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妖精的手指

木虫 (小有名气)

★ ★
408851978(金币+2): 积极应答 2011-11-27 09:10:18
呵呵,也不用,即使不溶的溶剂也不是绝对不溶的,所以用不溶或微溶的溶剂溶一溶,点板就应该可以点出来了;但是万一如果点不出来的话,建议用结晶铲类的东西挑一点点出来到单独的容器里,溶解点板,应该就能点出来了~千万别把洗干净的结晶全给溶了就是啦~
人生目标:农夫,山泉,有点田!
9楼2011-11-18 15:07:07
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铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 妖精的手指 at 2011-11-18 15:07:07:
呵呵,也不用,即使不溶的溶剂也不是绝对不溶的,所以用不溶或微溶的溶剂溶一溶,点板就应该可以点出来了;但是万一如果点不出来的话,建议用结晶铲类的东西挑一点点出来到单独的容器里,溶解点板,应该就能点出来 ...

哦,谢谢了,呵呵,想问下您是做什么的啊?
10楼2011-11-23 09:24:37
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